日本某公司液相色谱基础知识.pptx

液相色谱基础知识;一、色谱起源;液相色谱：以液体作为流动相的色谱分离方法 适用于高沸点、大分子、强极性和热稳定性差的化合物的分析 流动相具有运载样品分子和选择性分离的双重作用 气相色谱：以气体作为流动相的色谱分离方法 适用于沸点较低、热稳定性好的中小分子化合物的分析 流动相只起运载样品分子的能力 ;HPLC的分离类型;;;反相HPLC色谱柱; ;液相色谱流程图;流动相;溶 剂 等 级;水 / MeOH梯度 ODS 柱;溶 剂 等 级;;溶剂前处理; 30mm内径： 适用于大进样量的过滤，由0.22μm和0.45μm两种规格,材料有纤维素,醋酸纤维,聚四氟乙烯。处理样品体积少于50μl。 13mm内径： 适用于范围广的过滤，由0.22μm和0.45μm两种规格,材料为纤维素。 3mm内径： 适用于小进样量的过滤，由0.22μm和0.45μm两种规格。处理样品体积为7μl。 ;滤膜类型： ;溶剂前处理;流路中形成气泡引起的问题;输液泵;柱塞往复泵;柱塞往复泵;岛津VP系列输液泵;等度洗脱;梯度洗脱;;;梯度洗脱： 优点：可提高分离度、缩短分离时间、降低最小检测量和提高分离精度 注意事项： 溶剂的纯度要高，否则梯度洗脱的重现性差 梯度混合的溶剂互溶性要好 梯度洗脱应使用对流动相组成变化不敏感的选择性检测器（如紫外吸收检测器或荧光检测器），而不能使用对流动相组成变化敏感的通用型检测器（如示差折光检测器）;;;进样器;手动进样器的原理图;进样体积 ;柱温箱;色谱柱;流动相注意点;LC检测器;紫外可见检测器;;岛津VP系列紫外检测器功能;波长切换;双波长检测;比例色谱;波长扫描;二极管阵列检测器（SPD－M10AVP）;;三维谱图;二极管阵列检测器的优点;;乙酰水杨酸;光谱库检索;检测器; ;荧光检测器;数据处理