31DNA重组技术的基本工具上课.pptx

专题1 基因工程;一、基因工程的概念;1.1 DNA重组技术的基本工具;DNA重组技术的基本工具;1.限制性核酸内切酶——“分子手术刀” (1)来源: (2)化学本质： (3)作用 (4)作用特点： (5)切割方式;; T;限制酶所识别的序列有什么特点？ 限制酶所识别的序列，无论是6个碱基还是4个碱基，都可以找到一条中心轴线,中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称重复排列的。 图1-1 限制酶识别序列的中心轴线;当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时，产生的是平末端。;黏性末端;;平末端;;要想获得???个目的基因必须要用限制酶切几个切点？可产生几个黏性末端？一个目的基因有几个黏性末端？;2、ＤＮＡ连接酶——“分子缝合针”;种类： 作用部位：;E·coliDNA连接酶与T4DNA连接酶比较：;DNA聚合酶和DNA连接酶有何相同点和不同点？;;;据右图所示，有关工具酶功能的叙述不正确的是（　 ） A. 限制性内切酶可以切断a处，DNA连接酶可以连接a处 B. DNA连接酶可以连接a处 C. 解旋酶可以使b处解开 D. 连接b处的酶可以为DNA连接酶;3、基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”;常用的载体：质粒;不属于质粒被选为基因运载体的理由是 A、能复制 （ ） B、有多个限制酶切点 C、具有标记基因 D、它是环状DNA;议一议;思考与探究;2和7能连接形成…ACGT… ????????????? …TGCA…； 4和8能连接形成…GAATTC… ???????????? …CTTAAG…； 3和6能连接形成…GCGC… ???????????? …CGCG…； 1和5能连接形成…CTGCAG… ???????????? …GACGTC…。;2、为什么限制酶不能将自己的DNA分子剪切掉？;4.网上查询：DNA连接酶有连接单链DNA的本领吗？;;无论真核细胞还是原核细胞其基因均有编码区（能转录mRNA,进而编码蛋白质)与非编码区(不能转录mRNA,不能编码蛋白质），真核细胞基因的编码区可分为外显子（可编码蛋白质)、内含子(不能编码蛋白质）。 而密码子位于mRNA上，起始密码子有AUG（决定甲硫氨酸）和GUG（决定缬氨酸），而终止密码子则有UAA、UAG、UGA，不决定氨基酸