12基因工程的操作程序.pptx

复习回顾;8、载体主要有哪几类？其中，最常用的是？它的本质是？ 9、载体必须具备的四个条件是？ 10、写出限制酶切割后的黏性末端。 ;基因工程的基本操作程序;;; 基因工程的基本操作程序主要包括哪几个步骤？;;获取目的基因的常用方法有哪些?;(一)从基因文库中获取目的基因;(一)从基因文库中获取目的基因;4.cDNA文库的构建;两种基因文库的主要区别如下表（课本P10）;1、概念：PCR全称为________________，是一项在生 物____复制_____________的核酸合成技术 ;6、结果 ： ;;(二)利用PCR技术扩增目的基因动画演示;（三）人工合成目的基因; 化学合成法;问题4;复习回顾;;启动子：位于基因的首端的一段特殊的DNA片断，RNA聚合酶识别和结合的部位，启动转录 终止子：位于基因的尾端的一段特殊的DNA片断，能终止mRNA的转录（与终止密码子区别） 标记基因：鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将有目的基因的细胞筛选出来;3.基因表达载体的构建过程;;生物种类;1、将目的基因导入植物细胞的方法： （1）农杆菌转化法 ①农杆菌特点：;;（2）基因枪法：目的基因导入单子叶植物细胞;基因枪法;（3）花粉管通道法：将目的基因导入植物细胞;;;;——检查是否成功;;知识延伸——DNA分子杂交技术;;;（4）除上述分子检测外，有时还需进行 个体生物学水平的鉴定：如抗性特性;——检查是否成功;归纳: 基因工程的基本操作程序;【资料】 cDNA合成过程是： 第一步，反转录酶以RNA为模板合成一条与RNA 互补的DNA单链，形成RNA-DNA杂交分子。 第二步，核酸酶使RNA-DNA杂交分子中的RNA链 降解，使之变成单链的DNA。 第三步，以单链DNA为模板，在DNA聚合酶的作用 下合成另一条互补的DNA链，形成双链DNA分子。