NK细胞体外扩增培养基组合和培养方法发明专利.pdfVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 106701679 A (43)申请公布日 2017.05.24 (21)申请号 201611219682.0 (22)申请日 2016.12.26 (71)申请人 浙江丹晖生物科技有限公司 地址 311100 浙江省杭州市余杭区余杭经 济开发区新颜路22号401F (72)发明人 郭天欢　杨小芳　何淑婷　 (74)专利代理机构 北京英创嘉友知识产权代理 事务所(普通合伙) 11447 代理人 耿超　王浩然 (51)Int.Cl. C12N 5/0783(2010.01) C12M 3/02(2006.01) 权利要求书2页 说明书12页 附图3页 (54)发明名称 NK细胞体外扩增培养基组合和培养方法 (57)摘要 本公开涉及一种NK细胞体外扩增培养基组 合和培养方法，所述培养基组合，包括基础培养 基、诱导培养基、增殖培养基和活化适应培养基； 所述基础培养基的组成成分包括：RPMI-1640培 养基、GT-T551培养基、庆大霉素和BSA；所述诱导 培养基的组成成分包括：RPMI-1640培养基、GT- T551培养基、BSA、香菇多糖、灵芝多糖、茶多酚、 大蒜素和紫杉醇；所述增殖培养基的组成成分包 括：RPMI-1640培养基、GT-T551培养基、BSA、白细 胞介素；所述活化适应培养基包括：RPMI-1640培 养基、GT-T551培养基、胰岛素、转铁蛋白和谷氨 酰胺。通过上述技术方案，利用本公开所提供的 A NK细胞体外扩增培养基组合和方法培养获得的 9 NK细胞数量更多，在临床治疗中也具有更高的活 7 6 1 性。 0 7 6 0 1 N C CN 106701679 A 权　利　要　求　书 1/2 页 1.一种NK细胞体外扩增培养基组合，包括基础培养基、诱导培养基、增殖培养基和活化 适应培养基； 其中，所述基础培养基的组成成分包括：RPMI-1640培养基、GT-T551培养基、庆大霉素 和BSA； 所述诱导培养基的组成成分包括：RPMI-1640培养基、GT-T551培养基、BSA、香菇多糖、 灵芝多糖、茶多酚、大蒜素和紫杉醇； 所述增殖培养基的组成成分包括：RPMI-1640培养基、GT-T551培养基、BSA和白细胞介 素； 所述活化适应培养基包括：RPMI-1640培养基、GT-T551培养基、胰岛素、转铁蛋白和谷 氨酰胺。 2.根据权利要求1所述的培养基组合，其特征在于，所述白细胞介素为IL-12、IL-15、 IL-18和IL-21中的至少一种。 3.根据权利要求2所述的培养基组合，其特征在于，所述白细胞介素为IL-12、IL-15、 IL-18和IL-21。 4.根据权利要求1-3中任意一项所述的培养基组合，其特征在于，所述基础培养基包括 以下含量的各组分：庆大霉素50-90IU/mL、BSA  100-300μg/mL、RPMI-1640培养基与GT-T551 培养基的体积比为1：0.8-1.2。 5.根据权利要求1-3中任意一项所述的培养基组合，其特征在于，所述诱导培养基包括 以下含量的各组分：BSA  100-300μg/mL、香菇多糖50-80μg/mL、灵芝多糖50-80μg/mL、茶多 酚20-40μg/mL、大蒜素20-40μg/mL、紫杉醇20-40μg/mL，RPMI-1640培养基与GT-T551培养基 的体积比为1：1-1.4。 6.根据权利要求1-3中任意一项所述的培养