一种胶原蛋白纯化的方法发明专利.pdfVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 113105541 A (43)申请公布日 2021.07.13 (21)申请号 202110442977.9 (22)申请日 2021.04.23 (71)申请人 浙江崇山生物制品有限公司 地址 311100 浙江省杭州市余杭区东湖街 道红丰路650号54幢501室-1 (72)发明人 张智武　陈新亮　彭新生　周艳芳　 (74)专利代理机构 北京精金石知识产权代理有 限公司 11470 代理人 尉月丽 (51)Int.Cl. C07K 14/78 (2006.01) C07K 1/34 (2006.01) C07K 1/30 (2006.01) C07K 1/36 (2006.01) 权利要求书1页 说明书6页 附图1页 (54)发明名称 一种胶原蛋白纯化的方法 (57)摘要 本发明提供了一种胶原蛋白纯化的方法，涉 及蛋白质加工技术领域。本发明采用硅藻土+生 物絮凝剂的方式将溶液中的不溶物和非酸溶性 蛋白等组分沉淀，然后进行板框过滤将其去除， 不仅操作简单，而且可以节约后续超滤时间，提 高胶原蛋白的收率和纯度；盐析过程中使用质量 分数为15‑25％的氯化铵和质量分数为30‑40％ 的硫酸铵的混合物，并控制两者的体积比为5‑ 10:1，可以明显增加胶原蛋白的沉淀量，进而提 高胶原蛋白的收率；最后采用超滤膜结合管式超 滤膜的方式对混合液进行除盐，能够将盐析过程 中的盐全部脱除，保证了得到胶原蛋白的纯度， A 进而避免了因胶原蛋白中含有盐而造成的稳定 1 性降低。 4 5 5 0 1 3 1 1 N C CN 113105541 A 权　利　要　求　书 1/1页 1.一种胶原蛋白纯化方法，其特征在于：主要包括以下步骤： (1)取胶原蛋白粗提取液，加水稀释后，加入硅藻土和生物絮凝剂，吸附后进行板框过 滤，得到混合液A； (2)向混合液A中加入盐进行盐析后得固体B，将固体B复溶后，得到的复溶液使用滤膜 过滤，得到混合液C； (3)将混合液C进行管式超滤膜过滤，得到纯化后的胶原蛋白； 步骤(2)中所述的滤膜过滤的粒径分别为5微米、3微米、0.45微米，即复溶液先使用5微 米的滤膜过滤，所得滤液a再使用3微米的滤膜过滤，所得滤液b再用0.45微米的滤膜过滤， 得混合液C。 2.根据权利要求1所述的胶原蛋白纯化方法，其特征在于：步骤(1)中所述的生物絮凝 剂选自半乳糖葡糖醛酸、鼠李糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖中的一种或几种。 3.根据权利要求2所述的胶原蛋白纯化方法，其特征在于：所述的生物絮凝剂为质量比 4‑5:2:4‑5半乳糖葡糖醛酸、鼠李糖和葡萄糖的混合物。 4.根据权利要求3所述的胶原蛋白纯化方法，其特征在于：所述的生物絮凝剂为质量比 4:2:5半乳糖葡糖醛酸、鼠李糖和葡萄糖的混合物。 5.根据权利要求1所述的胶原蛋白纯化方法，其特征在于：所述的硅藻土与生物絮凝剂 的质量比为3‑6:1。 6.根据权利要求5所述的胶原蛋白纯化方法，其特征在于：所述的硅藻土与生物絮凝剂 的质量比为5:1。 7.根据权利要求1所述的胶原蛋白纯化方法，其特征在于：步骤(1)在絮凝过程中还添 加了乙酸，调节溶液pH值为2.5‑3.5。 8.根据权利要求1所述的胶原蛋白纯化方法，其特征在于：步骤(2)中所述的盐选自氯 化钠、氯化铵、硫酸铵中的一种或几种。 9.根据权利要求7所述的胶原蛋白纯化方法，其特征在于：上述步骤(2)中所使用的的 盐为质量分数为15‑25％的氯化铵和质量分数为30‑40％的硫酸