NK细胞体外扩增培养基组合和培养方法发明专利 (1).pdfVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利 (10)授权公告号 CN 106701679 B (45)授权公告日 2018.03.16 (21)申请号 201611219682.0 (56)对比文件 (22)申请日 2016.12.26 CN 105462924 A,2016.04.06, CN 105238752 A,2016.01.13,权利要求1- (65)同一申请的已公布的文献号 9. 申请公布号 CN 106701679 A CN 103031249 A,2012.12.10,说明书第31 (43)申请公布日 2017.05.24 段. US 4759635 A,1988.07.26,权利要求1-33， (73)专利权人 浙江丹晖生物科技有限公司 说明书第2页第10行-第55行. 地址 311100 浙江省杭州市余杭区余杭经 济开发区新颜路22号401F 审查员 赵楠 (72)发明人 郭天欢　杨小芳　何淑婷　 (74)专利代理机构 北京英创嘉友知识产权代理 事务所(普通合伙) 11447 代理人 耿超　王浩然 (51)Int.Cl. C12N 5/0783(2010.01) C12M 3/02(2006.01) 权利要求书2页 说明书12页 附图3页 (54)发明名称 NK细胞体外扩增培养基组合和培养方法 (57)摘要 本公开涉及一种NK细胞体外扩增培养基组 合和培养方法，所述培养基组合，包括基础培养 基、诱导培养基、增殖培养基和活化适应培养基； 所述基础培养基的组成成分包括：RPMI-1640培 养基、GT-T551培养基、庆大霉素和BSA；所述诱导 培养基的组成成分包括：RPMI-1640培养基、GT- T551培养基、BSA、香菇多糖、灵芝多糖、茶多酚、 大蒜素和紫杉醇；所述增殖培养基的组成成分包 括：RPMI-1640培养基、GT-T551培养基、BSA、白细 胞介素；所述活化适应培养基包括：RPMI-1640培 养基、GT-T551培养基、胰岛素、转铁蛋白和谷氨 酰胺。通过上述技术方案，利用本公开所提供的 B NK细胞体外扩增培养基组合和方法培养获得的 9 NK细胞数量更多，在临床治疗中也具有更高的活 7 6 1 性。 0 7 6 0 1 N C CN 106701679 B 权　利　要　求　书 1/2 页 1.一种NK细胞体外扩增培养方法，其特征在于，包括使用NK细胞体外扩增培养基组合， 所述方法包括： 基础培养：将分离的单个核细胞接种于基础培养基中培养1-2天获得基础培养细胞； 诱导培养：将所述基础培养细胞接种于诱导培养基中培养2-4天获得诱导培养细胞； 增殖培养：将所述诱导培养细胞接种于增殖培养基中培养4-7天获得增殖培养细胞； 活化适应：将所述增殖培养细胞接种于活化适应培养基中培养0.5-1.5天； 所述基础培养、诱导培养、增殖培养