基础医学色谱分析技术和色谱分析仪器.pptxVIP

会计学; 色谱仪器是近几十年来迅速发展起来的一类新型分离分析仪器，主要用于复杂的多组分混合物的分离、分析。 本章将系统介绍有关色谱仪器的原理、结构和使用。;第一节 色谱法概述; 色谱法（chromatography）是一种物理分离技术，实质上是利用混合物中各个组分在互不相溶的两相（固定相和流动相）之间的分配的差异而使混合物得到分离的一种方法，也有人称之为色层法、层析法等。; 色谱仪（chromatograph）的实质是利用色谱分离技术再加上检测技术，对混合物进行先分离后检测，从而实现对多组分的复杂混合物进行定性、定量分析。; 色谱分离中的两相是指系统具有一个有大比表面积的固定相（stationary phase）（可以是固体或以某种方式固定了的液体）和一个能携带待分离混合物流过固定相的所谓流动相（mobile phase）（可以是气体或液体）。; 色谱工作就是根据被测样品（混合物）的性质，选择适当的两相和其他操作条件，利用分离系统将各个组分分离开来，通过检测系统进行定性、定量分析。具有高分辨率、高灵敏度、样品量少且速度较快、结果准确等优点，是分析混合物的有效方法。;第一节 色谱法概述;一、色谱法的研究进展 1903年至1906年俄国植物学家茨维特（Tswett）首先利用分离及分析技术进行植物色素方面的研究，“色谱”因此而得名。 1931年，文特斯汀（Winterstein)开始将这种分离技术应用于无色物质的分离。; 1952年，马丁（Martin）等人提出了气液（分配）色谱法，正式推出了气相色谱技术，为色谱技术及色谱仪的发展开辟了广阔的前景。在50年代～60年代，气相色谱仪的发展速度几乎居各类分析仪器的首位。; 液相色谱技术的发展相当缓慢。直到60年代初，由于高压技术、高效固定相、检测技术的发展以及电子、计算机技术等方面的新成就的不断涌现，才给液相色谱技术及液相色谱仪的发展创造了有利条件，使它在70年代迅速发展起来。; 目前气相色谱仪和液相色谱仪都已发展成熟厂家在生产此类仪器，应用也十分普遍。 采用微处理器自动控制可以通过键盘操作完成色谱条件的设定、控制和对仪器工作状???的监控，色谱输出信息也可通过接口电路送入计算机进行计算、标定、测量与分析，最后用打印机等输出设备给出需要的结果。; 色谱仪的联用技术也越来越受到广泛的重视，如气相色谱仪和质谱仪的联用已十分普及，液相色谱仪与质谱仪的联用也在不断发展。微机化和联用技术在目前的色谱仪中既已普遍采用又在不断向纵深发展。; 在气相色谱仪中，除常用的填充柱气相色谱仪外，由于毛细管柱尤其是大口径毛细管柱的发展，毛细管柱气相色谱仪由于其强大的分离效能也得到了越来越普遍的应用。; 在液相色谱仪中，用得最多的还是高效液相色谱仪，但随著生物技术和生物医学工程学科的发展，制备型液相色谱仪、低压液相色谱仪、超临界流体色谱仪（特别是毛细管超临界流体色谱仪）、膜色谱技术、离子色谱仪也在不断研究、开发和应用。;二、基本原理 色谱是利用待分离的样品组分在两相中分配的差异而实现分离的。;第一节 色谱法概述; 由此可见，色谱分离的两要素是互不相溶的两相（流动相及固定相）以及样品（混合物）各组分在两相中分配的差异，它是决定色谱最终分离结果好坏的基础。;三、色谱仪的分类及其特点1.色谱仪的分类  目前比较成熟的主要是气相色谱仪与液相色谱仪（高效液相色谱仪）两大类。仪器的组成极为相似，主要由流动相供给、进样、分离（色谱柱）、检测、数据处理记录、温度控制和其他控制系统等组成。; 气相色谱仪具有高分辨率、高速度、高灵敏度及选择性好等优点。但只能用于被气化物质的分离、检测，而常压下可气化或可定量转变为气化的衍生物的物质，其总的比例大约只占几百万种化合物的20％左右。大部分物质不能被气化，因而也就不能用气相色谱法。; 液相色谱的样品无需气化而直接导入色谱柱进行分离、检测，特别适用于气化时易分解物质的分离、分析。约有70％左右的有机物能分析。通常认为有机物质分子量＜400时，用气相色谱仪；在400～1000时，最好用高效液相色谱仪；＞1000时用凝胶色谱(排阻色谱)。;2.色谱仪的特点  根据色谱分离的基本原理可以看出：色谱仪的主要特点是可以对混合物进行多组分分析或全分析。仪器结构简单，操作使用方便，具有应用范围广、样品用量少、高选择性、高效能、高速度以及高灵敏度等优点。;（1）应用范围广是指色谱仪可用于所有化合物的分离和分析，既能对有机物、无机物、低分子或高分子化合物，又能对有生物活性的生物大分子分离和测定。（2）样品用量少是指色谱仪用极少的样品就能完成一次分离及