分子荧光光谱实验报告.docx

百度文库-让每个人平等地捉升口我 百度文库-让每个人平等地捉升口我 12 12 分子荧光光谱实验报告 篇一：分子荧光光谱实验报告 分子荧光光谱实验报告 一、实验目的： 1?掌握荧光光度法的基本原理及激发光谱、发射光谱的 测定方法；学会运用分子荧光光谱法对物质进行定性分析。 了解荧光分光光度计的构造和各组成部分的作用。3. 了 解影响荧光产生的几个主要因素。二、实验内容： 测定荧光黄/水体系的激发光谱和发射光谱； 首先根据已知的激发波长（如果未知，则用紫外分光光 度计进行测量，以最大吸收波长为激发波长）测定发射光谱， 得到最大发射波长；然后根据最大发射波长测定激发光谱， 得到最大激发波长；然后在根据最大激发波长测定测定发射 光谱； 根据所得数据，用Origin软件做出光谱图。三、实验 原理： 某些物质吸收光子后，外层电子从基态跃迁至激发态， 然后经辐射跃迁的方式返回基态，发射岀一定波长的光辐射, 此即光致发光。光致发光现彖分荧光、磷光两种，分别对应 单重激发态、三重激发态的辐射跃迁过程。本实验为荧光光 谱的测定。 激发光谱：在发射波长一定的条件下，被测物吸收的荧 光强度随激发波长的变化图。 发射光谱：在激发波长一定的条件下，被测物发射的荧 光强度随发射波长的变化图。 各种物质均有其特征的最大激发波长和最大发射波长, 因此，根据最大激发波长和最大发射波长，可以对某种物质 进行定性的测定。 四、 荧光光谱仪的基本机构 五、 实验结果与讨论： XXOO SI / RI (CPS / MiCrOAmPS) 150000 IOOOOO 50000 OWaVeIength (nm) 400000 百度文库-让每个人平等地捉升口我 百度文库-让每个人平等地捉升口我 12 12 百度文阵-让每个人平專地捉升口我 百度文阵-让每个人平專地捉升口我 12 12 SI / RI (CPS / MiCrOAmPS) 300000 XXOO IOOOOO WaVeIength (nm) 400000 荧光黄/水体系第二次发射光谱SI / RI (CPS / MiCrOAmPS) 300000 XXOO IOOOOO WaVeIength (nm) 篇二：实验课-分子荧光光谱法实验报告 实验二分子荧光光谱法 ［实验目的］ 1、掌握荧光光度计的基本原理及使用。 2、了解荧光分光光度计的构造和各组成部分的作用; 3、掌握分子荧光光度计分析物质的特征荧光光谱：激 发光谱、发射光谱的测定方法。 ［实验原理］ 1、激发光谱与发射光谱 具有不饱和基团的基态分子经光照后，价电子跃迁产生 荧光，是当电子从第一激发单重态SI的最低振动能级回到 基态SO各振动能级所产生的光辐射。 激发光谱：是指发光的某一谱线或谱带的强度随激发光 波长（或频率）变化的曲线。横坐标为激发光波长，纵坐标 为发光相对强度。激发光谱反映不同波长的光激发材料产生 发光的效果。即表示发光的某一谱线或谱带可以被什么波长 的光激发、激发的本领是高还是低；也表示用不同波长的光 激发材料时，使材料发出某一波长光的效率。 荧光为光致发光，合适的激发光波长需根据激发光谱确 定一一激发光谱是在固定荧光波长下，测量荧光体的荧光强 度随激发波长变化的光谱；获得方法：先把第二单色器的波 长固定，使测定的?e∏!不变，改变第一单色器波长，让不同 波长的光照在荧光物质上，测定它的荧光强度，以I为纵坐 标，？ex为横坐标所得图谱即荧光物质的激发光谱，从曲线 上找岀？ex,实际上选波长较长的高波长峰。 发射光谱：是指发光的能量按波长或频率的分布。通常 实验测量的是发光的相对能量。发射光谱中，横坐标为波长 （或频率），纵坐标为发光相对强度。发射光谱常分为带谱 和线谱，有时也会出现既有带谱、又有线谱的情况。发射光 谱的获得方法：先把第一单色器的波长固定，使激发的？ex 不变，改变第二单色器波长，让不同波长的光扫描，测定它 的发光强度，以I为纵坐标，？em为横坐标得图谱即荧光物 质的发射光谱，从曲线上找岀最大的?em。 2、荧光分光光度计 包括四个部分，即激发光源、样品池、双单色器系统、 检测器。特殊点是有 两个单色器，光源与检测器通常成直角。 单色器：选择激发光波长的第一单色器和选择发射光 （测量）波长的第二单色器 光源：氤灯、高压汞灯、激光器（可见与紫外区） 检测器：光电倍增管 ［仪器材料］ 仪器：HORlBA FIUOrOmax-4荧光光谱仪 试剂：罗丹明 B 、 2-荼酚、 百度文库-让每个人平等地捉升口我 百度文库-让每个人平等地捉升口我 12 12 百度文阵-让每个人平專地捉升口我 百度文阵-让每个人平專地捉升口我 12 12 3, -DiethyloXadicatbocyanine iodide （碘化-3, 3 -二 乙基