微生物检验技术基础知识课件.ppt

四、微生物限度检查法 5.4 细菌、霉菌及酵母菌检查 ? 检查方法： 平皿法和薄膜过滤法 ? 按已验证的计数方法进行供试品的细菌、霉菌及酵母菌菌数 检查 四、微生物限度检查法 菌落报告规则： 细菌、酵母菌宜选取平均菌落数小于 300cfu ； 霉菌宜选取平均菌落小于 100cfu 的稀释级，作为菌数报告（ 即两位有效数字）的依据。 如各稀释级的平板均无菌落生长，或仅最低稀释级的平板有 菌落，但平均菌落数小于 1 时，以＜ 1 乘以最低稀释倍数的值 报告菌数。 四、微生物限度检查法 菌落报告 规则示例 各稀释级（供试液 1ml/ 皿）平均菌落计数 （ cfu ） 菌数报告数 （ cfu/ml.g ） 原液 1 ： 10 （ -1 ） 1 ： 10 2 （ -2 ） 1 ： 10 3 （ -3 ） 1 — 64 8 2 640 2 — 420 64 8 6400 3 — 不可计 420 64 64000 4 — 0 0.5 0 ＜ 100 5 — — 0 0 ＜ 100 6 — 0 0 0 ＜ 10 7 0 0 0 — ＜ 1 例：菌数报告规则表 1 四、微生物限度检查法 5.4.2 薄膜过滤法 滤膜孔径不大于 0.45 μ m ，直径一般为 50mm ，若需要用冲洗 液冲洗滤膜，每张滤膜每次冲洗量不超过 100ml ，总冲洗量 不得超过 1000ml 。 ? 贴膜 菌面朝上于相应的琼脂培养基平板上培养，每种培养 基至少制备一张滤膜。 ? 阴性对照试验 （不得有菌生长） ? 菌落报告规则 每张滤膜上的菌落数应不超过 100cfu ，若滤 膜上无菌生长，以＜ 1 乘以稀释倍数的值报告菌数。 四、微生物限度检查法 5.5 控制菌检查 供试品的控制菌检查应按已验证的方法进行，增菌培养基的 实际用量同控制菌检查方法的验证。 ? 阳性对照试验： 加菌量为 10 ～ 100cfu ，阳性对照试验应检 出相应的控制菌。 ? 阴性对照试验： 取稀释液 10ml 代替供试液，阴性对照应无 菌生长。 ? 按照不同的给药途径，必检的控制菌不同。 四、微生物限度检查法 不同给药途径制剂应检控制菌汇总 药品给药途径 应检控制菌 说明 局部给药制剂 金黄色葡萄球菌 所有制剂 铜绿假单胞菌 白色念珠菌 阴道给药 口服制剂 大肠埃希菌 所有品种 大肠菌群 含中药原药粉、 沙门菌 含动物组织（提取物） 给药 多途径给药制剂 同时检查各给药途径应检的控制菌 四、微生物限度检查法 5.6 微生物限度检查法结果判断 ? 供试品检出控制菌或其他致病菌时，按一次检出结果为准， 不再复试； ? 供试品的细菌数、霉菌及酵母菌数其中任何一项不符合该品 种项下的规定，应从同一批样品中随机抽样 ，独立复试两次 ，以 3 次结果的平均值报告菌数； ? 若供试品的细菌数、霉菌及酵母菌数、控制菌三项检验结果 均符合该品种项下的规定，判供试品符合规定，反之判供试 品不符合规定。 微生物检验技术 基础知识 目 录 ? 一、微生物基本介绍 ? 二、培养基 ? 三、菌种 ? 四、微生物限度检查法 一、微生物基本介绍 1 、微生物的定义 微生物是一些形体微小，以单细胞或简单多细胞、 甚至是没有细胞结构的形式存在的低等生物的统称。 2 、微生物的分类 微生物的主要分类单位：域、界、门、纲、目、科、 属、种、变种、亚种（小种）、型、菌株（品系） “种” 是最本的分类单位，例：大肠埃希菌 一、微生物基本介绍 3 、微生物的特点 ? 体形微小； ? 结构简单； ? 生长繁殖快； ? 种类繁多，分布广，适应性强。 ? 包括：细菌、酵母菌、霉菌、放线菌、立克次氏体、 支原体和病毒等。 一、微生物基本介绍 4 、微生物形态结构 ? 4.1 细菌 ? 4.2 真菌（包括酵母菌和霉菌） 一、微生物基本介绍 5 、微生物与我们 ? 每张人民币带细菌： 900 万个； ? 人体体表及体内存在大量的微生物； ? 皮肤表面：平均 10 万个细菌 / 平方厘米； ? 口腔“细菌种类超过 500 种； ? 肠道：微生物