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植物样蔗糖，淀粉，可溶性总糖测定 蔗糖，淀粉，可溶性总糖测定 0.1g干样（过100目筛） 8ml 80%乙醇 80℃水浴30 min 冷却 2000rpm离心20min 残渣 8ml 80%乙醇 80℃水浴30 min 冷却 2000rpm离心20min 残渣 8ml 80%乙醇 80℃水浴30 min 冷却 2000rpm离心20min 残渣 80℃烘干 冷却 加2ml蒸馏水 沸水浴20min，不断搅动 如果测定是植株样品，要将上清液中加少量活性碳，过滤后再定容。 合并上清液 定容至50ml 蔗糖测定 可溶性总糖测定 吸取0.9ml提取液 0.1ml 2N NaOH 沸水浴10min 吸1.0ml提取液+1.0ml水 4ml0.2%蒽酮试剂（用浓H2SO4配制）摇匀 冷却 冷却 15min沸水浴 2ml 9.2N HClO4 1ml 0.1%间苯二酚 10min不断振荡 3ml 10N HCl 加水6ml 冷却 80℃水浴60min 2000rpm离心25min 冷却 残渣 比色OD620 比色OD500 2ml 4.6N HClO4 合并上清液 10min不断振荡 定容至50ml 加水6ml 过滤 淀粉测定 （方法同可溶性总糖） 残渣 （注意：①加蒽酮试剂时，试管置于冷水浴中；②测蔗糖用0.9ml蒸馏水+0.1ml2N NaOH+1ml 0.1% 间笨二酚+3ml 10N HCl作参比；③测可溶性糖用2ml蒸馏水+4ml蒽酮试剂作参比。） 弃去 我们也是在使用同样的方法做同样的样品。 1：保证每管中加入的5ml（可以使用大肚管）0.2%蒽酮硫酸溶液与3.0ml（可以使用5ml的刻度管，但是必须标定）必须准确！ 2：保证每管的反应时间是完全的6分钟（拿秒表来计算，差异为正负3秒），这个可以两个人进行配合。 3：振荡时尽量使溶液混合均匀，如果在较短的时间没法混合均匀，建议振荡40秒―1分钟。 4：从振荡开始计算，到吸收度测定结束的时间至，必须控制在30分钟以内（标准规定是20-40分钟）。 5：0.2%蒽酮硫酸溶液必须在实验前就配制好，由于硫酸的密度较大，建议在样品配制好以前1小时配制好，加入试管时一定要摇匀。 6：为了保证试验的准确度，建议每个样品平行测定3-4管，这样的话可以消除由于自己的操作失误造成的试验结果不准确！ 以上几点时我在实验中发现并及时注意的几点经验，希望对楼主有所帮助！ 1. 葡萄糖标准曲线的制作： 准确称取0.1000g(在85℃烘箱中烘2小时)葡萄糖，溶解并定容至1000ml，即成0.1mg/ml葡萄糖母液，按下表分别吸入20ml具塞刻度试管中 0.1mg/ml葡萄糖母液（ml） 0.0 0.4 0.8 1.2 1.6 2.0 蒸馏水(ml) 2.0 1.6 1.2 0.8 0.4 0.0 葡萄糖(ml/管) 0.0 0.04 0.08 0.12 0.16 0.20 以下操作同可溶性糖的测定 2. 蔗糖标准曲线的制作： 准确称取0.1000g(在85℃烘箱中烘2小时)葡萄糖，溶解并定容至1000ml，即成0.1mg/ml葡萄糖母液，按下表分别吸入10ml具塞刻度试管中 0.1mg/ml葡萄糖母液（ml） 0.0 0.1 0.3 0.5 0.7 0.9 蒸馏水(ml) 0.9 0.8 0.6 0.4 0.2 0.0 蔗 糖(ml/管) 0.0 0.01 0.03 0.05 0.07 0.09 以下操作同可蔗糖的测定 3. 计算 从标准曲线上算得葡萄糖的mg数×稀释倍数 可溶性糖含量（mg/g）= 样品重（g） 从标准曲线上算得蔗糖的mg数×稀释倍数 蔗糖含量（mg/g）= 样品重（g） 从标准曲线上算得葡萄糖的mg数×稀释倍数×0.9 淀粉含量（mg/g）= 样品重（g） 实验24 植物组织中可溶性糖与淀粉的测定 植物体内的碳素营养状况以及农产品的品质性状，常以可溶性糖和淀粉的含量作为重要指标，本实验学习几种定量测定可溶性糖和淀粉的方法。 一、苯酚法测定可溶性糖 【原理】 植物体内的可溶性糖主要指能溶于水及乙醇的单糖和寡聚糖。苯酚法测定可溶性糖的原理是：糖在浓硫酸作用下，脱水生成的糠醛或羟