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生物工艺学作业习题加参考答案 生物工艺学作业习题 第一部分 菌种来源 一、名词解释 1、施加选择性压力分离法（P34） 给混合菌群提供一些有利于所需菌株生长或不利于其它菌型生长的条件,从而增加混合菌群中所需菌株的数量,达到分离目的. 2、恒化式富集培养 即连续富集培养，属于施加选择性压力分离法的一种。 是指通过改变限制性基质浓度来控制两种菌的比生长速率，使所需菌株占优势的菌种分离纯化方法。 3、随机分离方法 随机分离方法：P35 有些微生物的产物对产生菌没有任何选择性优势，可以开拓一种新的分离方法。因此常随机地分离所需菌种，并为此发展了一些快速筛选方法和归纳出高产培养基成分的选择性准则如下：⑴制备一系列的培养基，其中有各种类型的养分成为生长限制因素(即C、N、P、O)；⑵使用一聚合或复合形式的生长限制养分；⑶避免使用容易同化的碳（葡萄糖）或氮 （NH4+），因为它们可能引起分解代谢阻遏；⑷确定含有所需的辅因子；⑸加入缓冲液以减 少pH变化。 二、填空题 1、采集标本的预处理方法有物理方法 ，如 加热、膜过滤 ；化学方法，如 加1%几丁质培养 ；诱饵法，如 石蜡棒技术 。 2、筛选抗生素产生菌的方法包括 抑菌圈法 、 稀释法 、 扩散法 、 生物自显法 等，在这些方法中， 试验菌 的选择是成功的关键。 3、生长因子如氨基酸和核苷酸产生菌的分离用随机分离方法初筛，其方法主要是通过观察分离菌能否促进 营养缺陷型 的生长，来检出生长因子产生菌。 三、简答题 1、简述一般菌种分离纯化和筛选的步骤？（来源：课件第一章） 答：采样、预处理、增值和富集培养、纯种分离（稀释、划线、组织分离）、性能测定（初筛、复筛） 以上许多步骤均可引入选择压力，以提高筛选的效率。 2、获得所需菌种的几个关键点？ 获得所需菌种的关键点是: （1）生物产物的来源――微生物的选择。 1 (2)采用什么的筛选方案（检测系统）。P(30) 第二部分 菌种选育 一、名词解释 1、自然选育 在生产过程中，不经过人工处理，利用菌种的自然突变而进行菌种筛选的过程叫做自然选育。 2、诱变育种 在生产过程中，以基因突变为理论基础，经过人工处理，诱发菌种突变而进行菌种筛选的过程叫做诱变育种。 3、营养缺陷型 是指通过诱变而产生的缺乏合成某些营养物质 如氨基酸、维生素和碱基等的能力，必须在其基本培养基中加入相应的营养成分才能正常生长的变异株。 4、渗漏突变型 指因突变所产生的不完全遗传障碍，其基因所控制的反应程度不象野生型，但多少还能进行，称这种现象为渗漏（leakage），具有这种性质的突变型就称为渗漏突变型。它是处于野生型和营养缺陷型间的中间型，也叫缓慢生长型（bradytroph）。 5、抗结构类似物突变型（网上找的） 在结构类似物存在下仍可以合成末端产物的突变型 6、组成突变型（网上找的） 不管生长条件如何，酶的合成总量总是恒定的突变型 7、杂交育种 指将两个基因型不同的菌株经吻合（或结合）使遗传物质重新组合，从中分离和筛选具有新性状的菌株。（书上解释） 8、准性生殖 指真菌中不通过有性生殖的基因重组过程。 9、原生质体融合技术 所谓原生质体融合就是把两个亲本的细胞壁通过酶解作用加以瓦解，使菌体细胞在高渗环境中释放出只有原生质膜包裹着的球状体。两亲本的原生质体在高渗条件下使只混合，由聚乙二醇昨晚助融剂使他们互相聚集，发生细胞融合，接着量亲本基因组由接触到交换，从而实现遗传重组。 10、感受态 Ca2+与细胞外膜磷脂在低温下形成液晶结构，后者经热脉冲发生收缩作用，使细胞膜出现空隙，细菌细胞此时的状态叫做感受态。 二、填空题 2 1、突变主要包括 染色体畸变 和 基因突变 两大类；基因突变是指 DNA分子结构中的某一部位发生变化 ，即点突变。 2、常用的物理诱变剂是 紫外线、快中子；常用的化学诱变剂是 亚硝酸 和 NTG 。 3、准性生殖过程包括 异核体的形成 、 二倍体的形成 和 体细胞重组 。 4、原生质体融合技术的一般程序包括 原生质体的制备 ， 原生质体的融合， 原生质体的再生 和 融合子的筛选 。 5、原核表达系统常用的有 大肠杆菌 、 谷草芽孢杆菌 和 链霉