遗传的物质基础.ppt

或两条嘌呤和一条嘧啶链构成 (YR*R) CG*G，TA*A，CG*A。 G G G A C A A T C 第三十页，共53页。 六、DNA的变性和复性 变性：热，试剂，氢键、碱基堆积力破坏，DNA由双链变成单链 温度：80～100℃ 变性剂：尿素，甲酰胺 增色效应（hyperchromicity） 正常双链（50μg/ml） A260=1.00 完全变性的单链DNA A260=1.37 单核苷酸 A260=1.60 DNA双螺旋结构失去一半时，A260=1.185 第三十一页，共53页。 Tm值的影响因素： DNA的均一性 均一性高，Tm值的范围小 G-C含量 G-C含量高，Tm值高 经验公式 G-C%=(Tm-69.3)×2.44 介质中的离子强度 低离子强度易熔解变性 DNA保存在高浓度缓冲液中防变性（TE） 第三十二页，共53页。 复性 单链重新缔合为双螺旋的过程，一般比Tm低20～25℃下进行复性 过程：复性时溶液中单链DNA随机碰撞。GC先配对形成短的双链，然后配对区域延伸，象拉链一样 复性产生的不一定是原有的互补链，非原配 第三十三页，共53页。 影响DNA复性的因素： DNA复杂性 简单序列复性快 DNA浓度 高浓度复性快 DNA片断 片断小复性快，移动碰撞机会多 温度 过低温度减少互补链的碰撞机会 盐浓度 过低盐浓度使复性后的DNA又变性 第三十四页，共53页。 杂交： 不同来源的单链核酸经碱基互补配对而形成的双螺旋，DNA-DNA, DNA-RNA DNA杂交可反映不同生物中DNA的共同序列和不同序列，研究生物的进化， 核酸杂交是现代分子生物学的基础 第三十五页，共53页。 液相杂交 第三十六页，共53页。 滤膜杂交 第三十七页，共53页。 Cot曲线 DNA复性时的单链消失的速度 1 C/Co=―――― 1+KCot C：单链DNA浓度，Co：DNA总浓度，t：时间秒，k：=二级反应常数 复性的分数C/Co是起始浓度和经过时间的乘积（Cot）的函数。 第三十八页，共53页。 第一章遗传的物质基础 第一页，共53页。 教学目的 ： 学习分子遗传学的基本理论，重点是遗传物质在分子水平上的遗传信息流向和基因表达调控。利用分子遗传学的基本理论指导相关科研工作。 教学组织： 教师讲述和学生自学结合。 成绩评价： 课程论文 （ 50%）；按指定题目在规定时间内完成。 闭卷考试（50%）。 参考书籍： 分子遗传学。南京大学 分子遗传学，张玉静 95年以后出版的分子生物学 教材或专著 第二页，共53页。 第一章 遗传的物质基础――DNA DNA is the genetic material 第三页，共53页。 原核细胞和真核细胞 ? 原核 真核 细胞结构 多为单细胞, 多细胞,含多种细胞器, 无细胞核,无核膜、 有完整的核结构 核仁 遗传物质 一条染色体， 一般多条染色体, 裸露核酸分子, 核小体结构,经雌雄配子 通过质粒介导进行 进行遗传物质交流 单向遗传物质交流 其他功能 无溶酶体,不能通过 有吞噬和胞饮作用, 吞噬和胞饮作用进行 电子传递在线粒体膜 异物的消化，电子传递 在细胞膜 第四页，共53页。 一、DNA所带的遗传信息 作为遗传物质