《生物技术概论》课程总复习.pptx

现代生物技术的概念 技术手段（种类） ;第二章 基因工程 （Gene Engineering）;基因工程的一般流程;基因工程中常用的工具酶;基因克隆载体的概念：;载体类型;目的基因片段的获取;①模板DNA的变性：95℃ ②模板DNA与引物的退火(复性)：60 ℃ ③引物的延伸：72 ℃; 目的基因导入受体细胞; 重组子的筛选;1 根据重组DNA分子特征鉴定重组子 根据重组DNA分子大小鉴定重组子、根据重组DNA分子酶切图谱鉴定、PCR法、DNA杂交、应用DNA芯片鉴定重组子、根据DNA核苷酸序列鉴定重组子;基因工程的一般步骤(目的基因未知）;第三章 细胞工程;第二节 植物细胞工程;化学或物理法诱导;2.3 人工种子 用人工种皮包被植物胚状体或芽、营养成分、激素以及其他成分的人工胶囊。 ;人工种子;制作过程;1. 动物细胞、组织培养技术; 2. 动物细胞融合技术;合成抗体;3.微生物细胞工程;第四章 发酵工程;一、发酵工程概况： 现代发酵工程的定义;发酵周期；放罐时间;三、液体深层发酵： 液体深层发酵的操作方式（分批发酵；连续发酵；补料分批发酵）；各自优缺点；发酵过程主要影响参数;第五章 酶工程;第一节 酶的发酵生产 提高酶产量的措施 诱导物 阻遏物 表面活性剂 产酶促进剂;第二节 酶的分离纯化 酶的制备技术(破碎细胞、溶剂抽提、离心分离、过滤 、浓缩、干燥); 纯化与精制的方法（酶分子大小、电荷性质、专一性结合特性）； 第三节 酶分子的改造 酶分子的修饰方法 ;第四节 酶的固定化技术 固定化酶（细胞）的优点（不溶于水，便于分离；能回收、反复使用；稳定性；生产自动化；但不会持续维持生产能力逐渐提高） 酶固定化方法（载体结合、共价交联、包埋） 细胞固定化方法（直接法，包埋法，物理吸附法）;酶生物合成的模式;蛋白质工程概念，表达体系、设计目标 蛋白质工程研究的技术和方法： 蛋白质结晶学（X光衍射技术、核磁共振NMR ）； 蛋白质动力学（生物信息学、计算机辅助设计）； 改变蛋白质结构的核心技术是人工定点突变技术（位点特异性突变技术）;目前蛋白质工程研究的主要领域，研究程序一般如下： ;（4）通过表达载体获得较大量(0.1－1.0克)该蛋白质用于空间结构测定及结构与功能研究，借助计算机提出分子预测性质及改造方案 ;蛋白质组学（Proteomics）;双向电泳技术;第七章 生物技术的应用领域