微生物鉴定思路..doc

微生物的判定思路. 微生物的判定思路. PAGE / NUMPAGES 微生物的判定思路. 对于微生物的判定 革兰氏染色 初步分类 非苛养菌判定 苛养菌判定 真菌的判定 革兰氏染色 [ 原理 ] 革兰氏染色当前有三种看法：等电点学说、化学学说和浸透学说。 [ 标本办理 ]1. 有菌部位的标本，如痰液、粪便、各样拭子、创面等可直接涂片。 无菌部位的标本， 如脑脊液、 胸水、腹水、胆汁、尿液、关节液等， 应取适当标本 （最高可达 5-7ml ）, 经 3000rpm 离心 10min. ，取沉渣涂片染色。 [ 报告方式 ] ：革兰氏染色：检出 + - + 杆菌 - G球菌 ； G 球菌 ; 检出G ； G性杆菌 革兰氏染色 [ 注意事项 ] 1．标本涂片不可以太厚，严格按操作要求进行。 2．玻片经过分焰温度不可以太高。 3．若涂片较厚，应延伸脱色时间，直至不在出现紫色为止。 [ 临床意义 ] 经过革兰氏染色，将细菌分初步为革兰氏阳性和革兰氏阴性，便于临床治疗细菌的初步分类 1、 细菌的分别与纯化：自血平板挑出待检菌株的单菌落进行初步的判定。假如混有杂菌，应当从头转种分纯。 2、 染色与镜检： 第一经过革兰氏染色确立基本的分类：（ + - - + 杆菌。别的，假如镜 1）G球菌（ 2）G 球菌（ 3）G 杆菌（ 4） G 下发现革兰氏染色阳性、椭圆形、有芽孢状的较大菌体，可能是真菌。 临床标本中分别出许多的是 G-杆菌中的肠杆菌、非发酵菌和 G+球菌中的葡萄球菌、链球菌、肠球菌。 G-球菌中的奈瑟氏菌 亦常分别出，特别在泌尿生殖系统标本中常有。 细菌的初步分类 1. 触酶试验 主要用于 G+球菌的分类。葡萄球菌属：触酶（ +）链球菌属及肠球菌：触酶（ - ） 氧化发酵试验（ O-F试验） 依据细菌在无氧环境中可否利用碳源将细菌分为非发酵菌（氧化型或产碱型）和发酵菌（兼性 厌氧菌）。 G（ - ）杆菌中的肠杆菌 O-F试验阳性，非发酵菌 O-F试验阴性 3. 氧化酶试验 主要用于 G-杆菌的分类。肠杆菌的氧化酶（ - ），非发酵菌多半氧化酶（ +），但嗜麦芽窄食单胞菌和不动杆菌 的氧化酶（ - ）。 非苛养菌的判定 主要有 G+球菌、 G+杆菌、 G-球菌和 G-杆菌 这些细菌培育的条件不苛刻，这也是标安分别常有的细菌 苛养菌的判定也相对照较简单，只需依据初步的分类，按照其判定的门路，就能够做出完好的判定结果 G+球菌的判定门路 1. 第一依据菌落特色和革兰氏染色判断能否为 G+球菌。 2. 依据触酶结果判断为葡萄球菌 or 链球菌（肠球菌） +C （+） 葡萄球菌 菌落特色和 触酶（ —） 链球菌和肠球菌 G染色 G 葡萄球菌的判定 1. 对于葡萄球菌的判定第一依据 G染色和触酶实验确立 2. 依据菌落特色、能否溶血及特色，初步判断能否需要做 Co+：金黄色葡萄球菌 Co实验 —：其余葡萄球菌 系列生化结果判断葡萄球菌到种 NOTE：对于全部葡萄球菌都要判断其能否为 MRS，以指导临床用药。 链球菌的判定 第一依据 G染色和触酶结果确立为链球菌，而后再依据细菌的溶血状况和菌落特色判断判定门路 G +C 触酶（ —） 溶血性 α溶血 β溶血 γ溶血 Optochin 杆菌肽 cAMP 胆七 胆七 R S S S S + -- 胆七 肺链 A 群链球菌 B群链球菌 D群链球菌 D群链球菌 草绿色 6.5%NaCl -- + 非肠球菌 肠球菌 肠球菌的判定 依据 G染色和触酶初步判断，再据生化和药敏结果判定到种 +C G、触酶- 胆七、高盐 + 氨苄西林敏感实验 S R 粪肠球菌 屎肠球菌 需氧 G+b的判定 依据 G和抗酸染色（ A）将其分为： A+：分支杆菌、奴卡氏菌 A- ：李斯特菌属，芽胞杆菌属、棒状杆菌属、乳酸杆菌属、 丹毒丝菌属等需氧 G+b的判定 各属间判定，经过触酶和动力试验加以初步确立 1、触酶（ +）： 动力（ +）：李斯特菌属，芽胞杆菌属（大） 动力（ - ）：棒状杆菌属 2、触酶（ - ）： 动力（ +）：乳酸杆菌属（少） 动力（ -- ）：乳酸杆菌属，丹毒丝菌属 需氧 G+b的判定 各属间判定，依据一些染色（ G、A等）特色可初步判断 1. 棒状杆菌属 + ： G杆菌、菌体修长、无芽胞、无鞭毛、多形性、菌体染色不一样，有异染颗粒 2. 产单核细胞李斯特菌 ： 4° C可生长 、有狭小 ?溶血与链球菌差别：触酶（ +） 3. 红斑丹毒丝菌 ：无鞭毛，无芽胞，无荚膜 、分解 Glu 乳糖 、 H2S（ +） 4： 乳酸杆菌 ：触酶（ - ）、动力（ - ）、磺胺药物 R 青霉素 S 5：其余芽孢杆菌：注意这些细菌均有芽孢 需氧 G+b的判定 分枝杆菌属：营养要求高，一般生长迟缓 、有耐酸