紫外分光光度计实验报告.pdfVIP

UV-2550 紫外分光光度计的使用和分光光度法测定对苯二酚 9141160D0420 何琰 1. 目的 （1） 了解UV-2550 紫外光谱仪的基本使用方法。 （2 ） 了解测定对苯二酚的紫外光谱实验方法。 2. 试剂和仪器 2.1 试剂： 标准溶液0.10mg/mL，准确称取0.25g 对苯二酚溶于250ml 容量瓶中，用水 稀释至刻度，从中取出10ml 于100ml 容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀；pH=4.1 的乙酸-乙酸钠缓冲溶液。 2.2 仪器： UV-2550 型分光光度计。 3. 实验步骤 3.1 测量波长的选择 用吸量管吸取5.0ml对苯二酚标准溶液于25ml容量瓶中，加入0.5ml pH=4.1 的乙酸-乙酸钠缓冲溶液，用二次蒸馏水定容，振荡混匀。15 分钟后用1cm 比色 皿，275-330nm 波长范围, 进行扫描。从吸收曲线上读出对苯二酚的最大吸收波 长λmax。 3.2 对苯二酚含量的测定 (1)标准曲线的制作 在 6 个 25ml 容量瓶中，用吸量管分别加入 0，1.0, 2.0, 3.0,4.0,5.0ml 对苯二酚标准溶液，加入0.5ml pH=4. 1 的乙酸-乙酸钠缓冲溶液，用二次蒸馏 水定容，振荡混匀。用 1cm 比色皿，以试剂空白为参比溶液，在最大吸收波长 处，用光度模块作标准曲线。 (2)试样中对苯二酚含量的测定 准确吸取一定体积的样品于40ml 容量瓶中，加入0.5mlpH=4.1 乙酸- 乙酸钠， 用水稀释至刻度，摇匀。在光度模块中直接读出试样中对苯二酚含量。 4. 实验结果 4.1 测量波长的选择 从吸收曲线上读出对苯二酚的最大吸收波长λmax=288.80。 见图1 吸收曲线 4.2 对苯二酚含量的测定 (1)标准曲线的制作 见图2 标准曲线 (2)试样中对苯二酚含量的测定 对苯二酚含量0.354 相对误差为11.5% 图1 吸收曲线 图2 标准曲线