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UV-2550 紫外分光光度计的使用和分光光度法测定对苯二酚
9141160D0420 何琰
1. 目的
(1) 了解UV-2550 紫外光谱仪的基本使用方法。
(2 ) 了解测定对苯二酚的紫外光谱实验方法。
2. 试剂和仪器
2.1 试剂:
标准溶液0.10mg/mL,准确称取0.25g 对苯二酚溶于250ml 容量瓶中,用水
稀释至刻度,从中取出10ml 于100ml 容量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀;pH=4.1
的乙酸-乙酸钠缓冲溶液。
2.2 仪器:
UV-2550 型分光光度计。
3. 实验步骤
3.1 测量波长的选择
用吸量管吸取5.0ml对苯二酚标准溶液于25ml容量瓶中,加入0.5ml pH=4.1
的乙酸-乙酸钠缓冲溶液,用二次蒸馏水定容,振荡混匀。15 分钟后用1cm 比色
皿,275-330nm 波长范围, 进行扫描。从吸收曲线上读出对苯二酚的最大吸收波
长λmax。
3.2 对苯二酚含量的测定
(1)标准曲线的制作
在 6 个 25ml 容量瓶中,用吸量管分别加入 0,1.0, 2.0, 3.0,4.0,5.0ml
对苯二酚标准溶液,加入0.5ml pH=4. 1 的乙酸-乙酸钠缓冲溶液,用二次蒸馏
水定容,振荡混匀。用 1cm 比色皿,以试剂空白为参比溶液,在最大吸收波长
处,用光度模块作标准曲线。
(2)试样中对苯二酚含量的测定
准确吸取一定体积的样品于40ml 容量瓶中,加入0.5mlpH=4.1 乙酸- 乙酸钠,
用水稀释至刻度,摇匀。在光度模块中直接读出试样中对苯二酚含量。
4. 实验结果
4.1 测量波长的选择
从吸收曲线上读出对苯二酚的最大吸收波长λmax=288.80。
见图1 吸收曲线
4.2 对苯二酚含量的测定
(1)标准曲线的制作
见图2 标准曲线
(2)试样中对苯二酚含量的测定
对苯二酚含量0.354
相对误差为11.5%
图1 吸收曲线
图2 标准曲线
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