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实验一:大肠杆菌5 a和21感受态细胞的制备
【实验步骤】
1从平板上挑取新活化的大肠杆菌 5a单菌落,接种到5培养基中,37C振荡培养过夜。
2取1培养物接种到100培,养基(250三角瓶)中,37C振荡培养2?3h。
3将菌液转移到50离心管(2管)中,冰上放置15。
4 4C 4000离心5,弃去上清液,倒置使培养液流尽。
5用20冷2溶液悬浮菌体沉淀合并成一管,在 4C 4000离心5,弃去上清液。
6用10冷2溶液悬浮菌体沉淀,冰浴30o
7 4C4000离心5,弃去上清液,用2的冷2溶液悬浮。
载体的转化(无菌条件,冰上进行)1、取200
载
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