高中生物_动物细胞融合和单克隆抗体的制备教学课件设计.ppt

？ ？ ？ ？ 再分化 ？ 植物细胞杂交技术利用什么原理？ 用什么方法可以诱导植物细胞融合？ 一、原理： 细胞膜具有流动性 细胞的全能性 二、诱导方法：离心 振动 电激 、聚乙二醇 植物细胞杂交技术有什么目的？ 三、目的： 获得杂种植株 脱分化 (一)概念 动物细胞融合也称细胞杂交,是指两个或多 个动物细胞结合形成一个细胞的过程。 （二）动物细胞融合的过程 与植物原生质体融合原理相同，方法类似。 杂交细胞:融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞。 一、动物细胞融合 ⑴.原理： 1、动物细胞融合的基本原理是什么？ 2、动物细胞融合的诱导方式是什么？与植物细胞融合的诱导方式有什么不同？ 与植物原生质体融合的基本原理相同，即细胞膜的流动性。 ⑵.诱导方式： 物理法： 电激、振动、离心 化学法： 聚乙二醇（PEG） 生物法： 灭活的病毒 例如：仙台病毒 细胞A 细胞B 杂交细胞 灭活的病毒 物理法 化学法 为什么灭活病毒能够作为诱导剂？不灭活的是否可以？ 因为灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合，不灭活的话会感染细胞，而不能诱导细胞融合。 灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面 细胞膜被病毒颗粒穿通 细胞膜连接 细胞融合，形成杂交细胞 （细胞膜具有一定的流动性） (三)动物细胞融合的应用 1.突破有性杂交方法的局限,使远缘杂交成为可能。 2.成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段。 鼠—鸡、鼠—兔、鼠—猴、人—鼠、人—兔、 人—鸡、人—蛙、酵母菌—鸡 、人—胡萝卜等 3、重要用途：制备单克隆抗体。 二、单克隆抗体 （一）、什么是抗体？ 抗体是机体受抗原刺激后产生的、并能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。 三、单克隆抗体 1、抗体是由何种细胞产生的？ 浆细胞（效应B细胞） 2、抗体是如何产生的？ B淋巴细胞 抗原 增殖分化成浆细胞 3.获得抗体的传统方法 把某种抗原反复注射到动物体内，然后从动物血清中分离出所需的抗体。 缺点： 产量低，纯度低，特异性差。 4、一种B淋巴细胞能产生几种抗体？ 一种 1、在体外培养的条件下，一个B淋巴细胞有没有可能无限增殖？ 不可能 2、我们学过的什么细胞具有这样的能力？ 癌细胞 3、有什么办法让B淋巴细胞也具有这样的能力？ 细胞融合 一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 骨髓瘤细胞（癌细胞）能无限增殖 杂交细胞 动物细胞培养技术 （三）、实验原理： 动物细胞融合 单克隆抗体 既能迅速大量繁殖，又能产生专一抗体， （四）、单克隆抗体的制备过程 3.过程： ①免疫动物 注射抗原的目的是什么？ 获得能产生相应抗体的B淋巴细胞（浆细胞） 诱导细胞融合常用方法是什么？ 灭活的仙台病毒 如何进行筛选？ 具有筛选作用的培养基（选择培养基） ？种 BB 、B瘤 、 瘤瘤 、 杂交细胞 如何获得大量的单克隆抗体？ ②免疫B细胞和骨髓瘤细胞的制备 ③细胞融合 ④杂交瘤细胞的选择培养 ⑤杂交瘤细胞的筛选 ⑥分泌单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立 ⑦单克隆抗体的大量制备 ？ ？ 抗原 效应B细胞 筛选 筛选 （AA型、BB型） AB型杂交瘤细胞 能产生所需抗体的细胞 过程： 抗原 小鼠 效应B细胞 骨髓瘤细胞 杂交瘤细胞 细胞融合 筛选 　细胞培养 筛选 能产生特定抗体的细胞群 体外培养 体内培养 提取出单克隆抗体 单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞 诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞， 在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（ ） ①淋巴细胞　②小鼠骨髓瘤细胞　③B淋巴细胞自身融合细胞　④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞　 ⑤杂交瘤细胞 A． ②④ B．①③⑤　　 C． ①②③④ 　 D．②③