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细菌遗传课时1.拟核细胞(nucleoid cell)：无核膜，原核生物(prokaryotes)2.繁殖快：约20min/代，哺乳动物细胞分裂24h的1/70 3.体积小：长1-5μm，宽0.5-1μm；4.群体大：一支试 管可盛数百万个个体。一、细菌及其基因组（一）细菌细胞(bacterium cell)1、双链环状；2、无蛋白质包装；3、成环短缩变粗。如E.coli 染色体1333μm，300μm成环为25μm，50环后为1.5μm。一、细菌及其基因组（二）细菌基因组(bacterium genome)一、细菌及其基因组(三)细菌突变体(Bacterium mutants) 1.合成功能突变体( anabolic functional mutants) 常见7种 met- thr- his- leu- pyr-(嘧啶) cyc-(胱氨酸) thi-(硫氨酸)等2.分解功能突变体(catabolic functional mutants)常见7种 lac- gal- aru- mal- xyl-(木糖) rha-(鼠李糖) pdx-(吡哆醇)等3.抗性突变体(resistant mutants) 常见3种 azir strr tonr分别抗叠氮化钠,链霉素,噬菌体突变,其野生型分别为azis strs tons4.克隆形态突变(form mutants)常见2种 h,r分别为广寄主,速溶型突变,其野生型分别为h+ r+ 5.基础代谢突变(metabolism mutants) 抑制无义突变 su+ 野生型为su- 温度敏感突变ts 野生型为ts+1.重组频率高 高频重组Hfr细菌的重组率达10-22.突变率高，突变体 突变率多为10-6，变幅为10-4-10-73.易表达检测 单倍体，隐性突变易表达。基本和添加物培养基印迹法接种易鉴别。4. 拟有性 细胞内有致育因子，能导致细菌间拟有性结合，能引起细菌间及细菌与病毒间遗传物质转移。一、细菌及其基因组(四) 细菌突变特点1.Griffith转化实验（1928），肺炎双球菌死S能表达二、转化重组（transformation recombination）(一)转化试验(transformation experiment) 16年后，Avery 死S分别添加S血清RNA酶, DNA酶和蛋白质，再分别与R混合培养。仅添加DNA酶的S性状才不表达。测定死S均为1μm长约2万bp的片段。证明死S的DNA片断在没有降解时,能被R吸收并表达，称转化。S-DNA片断被R吸收、表达二、转化重组（transformation recombination）(一)转化试验(transformation experiment)2. Avery转化实验(1944)1. DNA转化过程 转化在生物界普遍存在。吸收?联会?交换?整合?表达。2.转化子(transformation) 供体DNA片段与受体基因组整合形成的重组DNA分子。3.特点⑴受体允许的特定区间进入；⑵需要酶参加；氯霉素抑制酶活性可抑制DNA转化。⑶需要能量；二硝基苯阻碍能量供应，可抑制DNA转化。⑷转化率低。二、转化重组（transformation recombination）(二)转化过程与转化子(transformation )供体：野生型枯草杆菌，碾成 DNA片断(1μm, 2万bp) 受体：trp-、his-、tyr-突变型，与供体混合培养4h。 供体片段不整入受体会丢失；交换整合方式有7种；用基本和添加trp,his,tyr不同组成的培养基培养，能获得7种转化子。培养基 基本 加trp加trphis 加trptyr 加histyr 加his 加tyr + + +- - -+ + +- - -+ + +- - -+ + +- - -+ + +- - -+ + +- - -+ + +- - -二、转化重组（transformation recombination）(三)转化作图（transformanted mapping）1.Nester转化实验 trp-his-tyr供体，忽视1对基因后两两连锁基因定位，求重组率⑴ trp-his间交换有5种NPT，--+是亲型且呈线状死亡,不作分子分母⑵ his-tyr间交换有5种NPT，+--是亲型且呈线状死亡,不作分子分母⑶ trp-tyr间交换有5种NPT，-+-是亲型且呈线状死亡,不作分子分母分子:3660+418+2600 +107分母:20590-685 分子：685+418+107+107分母：20590-2600 分子:3660+685+2600+1180分母:20590-418 二、转化重组