鞣质含量测定法.pdf

1 2 文件编号 SOP-QC-628 版号 A 页码 / 1. 目的 建立鞣质含量测定法操作规程。 2. 适用范围 本规程适用于鞣质含量测定法。 3. 编制依据 《药品生产质量管理规范（ 1998年修订）》 国家药品监督管理局（ 1999） 4. 责任 4.1 QC质检员对本规程的实施负责。 4.2 QC主管对本规程的有效执行承担监督检查责任。 5. 正文 5.1 简述 5.1.1 中国药典 2010年版一部附录Ⅹ B 为磷钼钨酸—干酪素紫外—可见分光光度法。 5.2 仪器与用具 5.2.1 紫外可见分光光度计。 5.2.2 量瓶、移液管、具塞锥形瓶。 5.3 试药与试液 5.3.1 没食子酸对照品。 5.3.2 磷酸、盐酸（分析纯） 。 5.3.3 干酪素（生化试剂） 。 5.3.4 磷钼钨酸试液应符合中国药典 2010 年版一部附录Ⅹ B 的规定。 5.3.5 29% 碳酸钠溶液取碳酸钠（ NaCO3 ·10H2 O）29g 或无水碳酸钠 10.8g ，加水 100ml 溶解。 5.4 操作方法 本实验应避光操作。 5.4.1 对照品溶液的制备 精密称取没食子酸对照品 50mg，置 100ml棕色量瓶中，加水 溶解并稀释至刻度，精密量取 5ml，置 50ml 棕色量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，即得 （每1ml 中含没食子酸 0.05mg）。 5.4.2 标准曲线的制备 精密量取对照品溶液 0.5ml 、1ml、2ml、3ml、4ml 、5ml，分别 置 25ml 棕色量瓶中， 各加入磷钼钨酸试液 1ml，再分别加水 11.5ml 、11ml、10ml、9ml、 8ml、7ml，用 29%碳酸钠溶液稀释至刻度，摇匀，放置 30 分钟，以相应的试剂为空白， 照紫外—可见分光光度法（附录Ⅴ A ），在 760nm的波长处测定吸光度，以吸光度为纵 文件编号 SOP-QC-628 版号 A 页码 2/ 2 坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。 5.4.3 供试品溶液的制备按各品种项下规定的量取样， 精密称定，置 250ml 棕色量瓶中， 加水 150ml，放置过夜，超声处理 10 分钟，放冷，用水稀释至刻度，摇匀，静置（使 固体物沉淀）。滤过，弃去初滤液 50ml，精密量取续滤液 20ml，置 100ml 棕色量瓶中， 用水稀释至刻度，摇匀，即得。 5.4.4 测定法 5.4.4.1 总酚 精密量取供试品溶液 2ml，置 25ml 棕色量瓶中， 照标准曲线制备项下的 方法，自“加入磷钼钨酸试液 1ml”起，加水 10ml，依法测定吸光度，从标准曲线中读 出供试品溶液中没食子酸的量（ mg），计算，即得。 5.4.4.2 不被吸附的多酚 精密量取供试品溶液 25ml，加至已盛有干酪素 0.6g 的 100ml 具塞锥形瓶中，密塞，置 30℃水浴中保温 1 小时，时时振摇，取出，放冷，摇匀，滤 过，弃去初滤液，精密量取续滤液 2ml，置 25ml 棕色量瓶中，照标准曲线制备项下的 方法，自“加入磷钼钨酸试液 1ml”起，加水 10ml，依法测定吸光度，从标准曲线中读 出供试品溶液中没食子酸的量（ mg），计算，即得。 5.5 记录与计算 5.5.1 记录对照品、供试品的称样量，测定过程供试品溶液稀释、量取的体积等；标准 曲线的制备中对照品溶液的量取体积以及相应