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非洲猪瘟p54蛋白的原核表达和纯化.docx

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  摘要:p54蛋白是非洲猪瘟病毒(ASFV)的主要结构蛋白之一,对内质网膜的募集和转化进入病毒包膜的前体极 其重要。为了进一步探究p54蛋白的免疫功能,本研究将ASFV p54截短蛋白基因插入原核表达载体pET28a,构建重组 质粒p54-pET28a,然后将重组质粒p54-pET28a转入BL21(DE3)细胞中进行诱导表达,通过摸索诱导温度、时间及诱导 剂浓度,确定p54蛋白可溶性表达的最佳条件,并利用融合标签His-tag对p54蛋白进行纯化,SDS结果显示表达 的p54蛋白大小为20kDa,和预期大小相符,Western blot检测结果表明纯化后的蛋白可与His单抗和ASFV阳性

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