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【变式训练】下列对植物组织培养过程中的脱分化的叙述,正确的是 ( ) A.植物体的分生组织通过细胞分裂产生新细胞的过程 B.体内分化的细胞形态、结构和功能发生改变的过程 C.高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程 D.愈伤组织分裂产生大量相同细胞的过程 【解析】选C。脱分化是指已经高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程。 类型二 植物组织培养的过程及无菌操作 【典例2】下图为植物(菊花)组织培养过程示意图,请据图回答: 世纪金榜导学第四部分 浅尝现代生物技术 实验11 植物的组织培养 一、植物组织培养 1.概念:取一部分植物组织,在_____的条件下接种在 三角瓶中的琼脂培养基上,给予一定的温度和光照, 使之产生_________,或进而生根发芽。 无菌 愈伤组织 2.培养基: (1)发芽培养基:细胞分裂素浓度_____生长素浓度的 培养基。 (2)生根培养基:生长素浓度_____细胞分裂素浓度的 培养基。 大于 大于 3.培养中加入的激素:_______和___________。 4.实验中使用的激素:人工合成的____________代替生 长素;人工合成的_______________代替细胞分裂素。 生长素 细胞分裂素 萘乙酸(NAA) 苄基腺嘌呤(BA) 5.培养过程: 愈伤组织 脱分化 再分化 二、菊花的组织培养 1.材料:MS培养基、_____培养基、_____培养基、 _______(NAA)、苄基腺嘌呤(BA)、菊花幼苗等。 发芽 生根 萘乙酸 2.操作流程: 无菌幼苗 生芽培养基 18~25 14.5 生根培养基 80%以上 自然湿度 土 3.自然生长的茎的消毒处理: 乙醇 次 氯酸钠 无菌水 一、植物组织培养的理解 1.理论基础:植物细胞的全能性。 2.细胞具有全能性的原因:生物体的每个体细胞都是由受精卵经有丝分裂形成的,含有本物种全套的遗传物质,都有发育成完整个体所必需的全套基因。 3.植物体细胞表现出全能性的条件:脱离原来所在植物体(离体培养)、营养供给、激素控制、无菌条件、适宜的温度、pH和光照等外界条件。 4.植物组织培养的过程: (1)植物组织培养的一般过程分析。 有根、芽或有生根发芽的能力 由愈伤组织形成幼苗或胚状体结构 再分化 ①离体 ②提供营养物 质(有机物、 无机物) ③提供激素 ④提供其他适 宜条件 排列疏松、高 度液泡化的薄 壁细胞团 由外植体形成愈伤组织 脱分化 条 件 特 点 过 程 名称 栽培 由根、茎、叶、花、果实、种子组成 发育成完整的植物体 营养生 长、生 殖生长 条 件 特 点 过 程 名称 (2)根尖分生组织和愈伤组织的异同。 都通过有丝分裂进行细胞增殖 相同点 再分化成 新个体 疏松 高度 液泡化 无定形 高度分 化细胞 愈伤 组织 分化成 多种细 胞组织 紧密 无液泡 正方形 受精卵 根尖 分生 组织 细胞 去向 细胞 排列 细胞 结构 细胞 形态 细胞 来源 组织 类型 5.植物激素在组织培养过程中的重要作用: (1)在配制好的MS培养基中,常常需要添加植物激素。植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。 (2)激素使用的先后顺序及其用量的比例对细胞分裂和分化的影响。 ①激素使用的先后顺序产生的影响: 分化频率提高 同时使用 细胞既分裂也分化 先使用细胞分裂素,后 使用生长素 有利于细胞分裂,但细 胞不分化 先使用生长素,后使用 细胞分裂素 实验结果 使用顺序 ②激素用量比例产生的影响: 愈伤组织继续生长不分化 比值适中 诱导芽的生成 比值低时 趋于长根 比值高时 结 果 生长素/细胞分裂素的值 【名师点拨】 (1)细胞全能性大小的比较:受精卵生殖细胞体细胞;幼嫩组织细胞成熟组织细胞;分化程度低的细胞分化程度高的细胞。 (2)脱分化的结果形成了愈伤组织,愈伤组织细胞的分化程度降低了,但全能性提高了。 二、无菌操作的分析 1.无菌技术是植物组织培养获得成功的关键: (1)无菌操作的原因:由于植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差,所以对培养条件的要求高。用于植物组织培养的培养基同样适合于某些微生物的生长,如一些细菌、真菌的生长。而培养物一旦受到微生物的污染,就会导致实验前功尽弃,因此要进行严格的无菌操作。 (2)无菌操作的对象:无菌操作包括对培养基、器械和植物材料(外植体)的灭菌消毒。对培养材料进行表面消毒时,一方面要考虑药剂的消毒效果,另一方面要考虑植物材料的耐受性。 (3)妥善处理被污染的培养物:一旦发现培养材料被污染,特别是真菌污染,一定要先灭菌然后再打开清洗。 2.污染原因与处理措施: 将被污染的培养瓶统一放在高压蒸汽锅 内进行高压蒸汽灭菌,然后再打开培
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