聚乙烯亚胺溶液配制说明书.pdf

上海起发实验试剂有限公司 线性聚乙烯亚胺溶液配制说明书 —— polysciences #23966,1mg/ml 转染试剂的配制 转染试剂线性 PEI 溶液的配制 聚乙烯亚胺（ Polyethylenimine ， PEI）是聚乙烯亚胺是一种具有较高的阳离子电荷密度的有机大分 子，每相隔二个碳个原子，即每“第三个原子都是质子化的氨基氮原子，使得聚合物网络在任何 pH 下 都能充当有效的“质子海绵” (proton sponge)体。 PEI ，可用作转染试剂，它可以缩聚 DNA 分子形成颗 粒并转染真核细胞。有实验证明，分子量为 25000 的线性 PEI 即 Polysciences 23966 转染效率最高。 下面将主要介绍 polysciences 线性 PEI(#23966) 的产品特性及其溶液的配制过程。 1. 产品特性 : 产品名称：线性聚乙烯亚胺 (PEI) CAS 号 9002-98-6 ，26913-06-4 分子式 (CH 2 CH2NH)n 分子量 25000 熔点 73-75 °C 外观 白色或黄色固体 结构式 溶于热水， 低 pH 值的冷水， 甲醇和乙 溶解性 储存 室温 醇；不溶于：苯，乙醚和丙酮 2. 溶液配制 此指导说明书是经 polysciences 公司研究，测试及其客户反馈的后编写的。下面推荐一种简单适用 而高效的方法，讲述如何配制浓度为 1mg/mL 的转染试剂的配制。 材料： 1g #23966 、1L 纯水（ Milli-Q? 纯水，注射用水（ WFI ），或类似的生物级水）、 12 M 盐酸、 10 M 氢氧化钠、一次性 0.1-0.2 μmPES 真空无菌过滤器、无菌高聚乙烯或聚丙烯试剂瓶。 器材： 1 L 玻璃烧杯、 1 L 玻璃量筒、核准 pH 计、 2 支 1 mL 塑料移液管、托盘、聚四氟乙烯（ PTFE ）搅 拌棒、真空泵 配制过程： 1g #23966—— 900mL 水溶解——搅拌、 加热 （60-80 °C ）——加 HCl 调 pH 到 2.0 左右——盖上烧 杯，搅拌 3h （直至粉末完全溶解）——冷却至室温——加 NaOH 调 pH 到 6.9-7.1 ——移液到量筒，加 水补足至 1L——真空过滤消毒——分装， -20 °C 保存。 备注： 加热或加酸都有助于 PEI 溶解。当然酸可能不用加那么多，详细用量可试加一点搅拌看看， 足够溶解就行，不一定需要加到 pH 那么低。 试剂储存： 冷冻部分溶液可在 -20 °C 保存长达一年；部分解冻的溶液可在 4 °C 保存 2 周，不可反复冻融。 粉末储存： 未开封的粉末有效期两年。可在室温下保存直至使用。 参考文献： 1. 聚乙烯亚胺（ PEI ）、线性 (1 mg/mL). Cold Spring Harbor Protocols 2008, pdb.rec11323 –pdb.rec11323 (2008). doi:10.1101/pdb.rec11323. 上海起发实验试剂有限公司 Catalog# 23966 –Polyethylenimine, Linear, MW 25000 (PEI 25K) Transfection Reagent Preparation and Storage Recomm