马铃薯品质测定方法.pdf

（三）薯块淀粉含量测定：高氯酸水解 -蒽铜比色法 ： （1）实验原理 ：用乙醇溶液去除饲料样品中的可溶性糖，再用高氯酸溶液溶解残留物 中的淀粉， 使淀粉与其他成分分离， 在浓硫酸的作用下， 蒽酮与淀粉反应生成蓝绿色的化合 物，用分光光度计测定在 640 nm 下的吸光度 .试剂配制： 80 ％乙醇溶液； 52 ％高氯酸溶液； 蒽酮试剂 (将 0.4 g 蒽酮溶于 100 mL88 ％硫酸溶液中，现用现配 ) ；淀粉标准液 (将200 mg 淀 粉倒入 100mL 烧杯中，加入 5 mL 蒸馏水，加入 65 mL52 ％高氯酸溶液，搅拌全部溶解，转 入 100 mL 溶量瓶中，加水定容， 浓度 2 mg ／mL ；取上述标准淀粉溶液 10.00 mL 于250 mL 溶 量瓶中，加水定容，此淀粉溶液的浓度为 80 ug ／mL. ) （2 ）标准曲线： 在洁净的试管， 分别加入 0 μL 、250 μL 、500 μL、1000μL 、1500μL 、2000 μL 淀粉标准液，每一个浓度 3个重复，加水调整各试管溶液均为 2.00 mL ，在冰水中冷却 2 min 加入 6.00 mL 蒽酮－硫酸溶液，摇匀， 在冰水中冷却 2 min ，将试管放入沸水中 5 min ，各试管 显色呈蓝绿色，取出试管，冷却至室温。用 2.00 mL 蒸馏水按照上述操作作为空白参比，于 640nm 波长下比色， 测定各试管溶液的吸光度。 以吸光度为横坐标， 淀粉浓度作为纵坐标， 绘制工作曲线，进行曲线拟合，得到吸光度和淀粉浓度之间的回归方程。 （3）操作步骤： 称取 2.5 g 饲料样品于 50 mL 离心管中，其中包括 2个重复，加入 80 ％乙 醇溶液 2滴使样品湿润， 再加入 5 mL 水摇匀，加入 25 mL 热的 80 ％乙醇溶液 , 摇匀后放置 5 min, 以2 500r ／min速度离心 5 min ，倾出上清液，再用 30 mL 80 ％乙醇溶液提取 1 次。于上述残 留物中加入 5 mL 水和 30 mL 52 ％高氯酸溶液，搅拌 10 min ，以 2 500r ／min离心 10 min ，将 上清液转入 100 mL 溶量瓶中，残留物再用 35 mL 52 ％高氯酸溶液提取，合并提取液，以水 定容。过滤，弃去最初 5 mL 滤液。吸取 10.00 mL 滤液于 250 mL 溶量瓶中，加水定容，取上 述淀粉提取液 2.00 mL ，测定沸水浴显色后溶液的吸光度。 （四）、还原糖含量的测定： 3 ，5-二硝基水杨酸比色法（ DNS ）： 3，5-二硝基水杨酸溶液与还原糖 (各种单糖和麦芽糖 )溶液共热后被还原成棕红色的氨基 化合物， 在一定范围内， 还原糖的量和棕红色物的颜色深浅的程度成一定比例关系在 540nm 波长下测定棕红色物质的消光度值，查标准曲线，便可求出样品中还原糖的含量。 （1）仪器与用具： 25ml 血糖管或刻度试管； 大离心管或玻璃漏斗； 100mL 烧杯； l00mL 三角瓶； l00mL 容量瓶；刻度吸管 1、2 、l0mL ；沸水浴；离心机 (过滤法不用此设备 ) ；电子 天平；分光光度计。 （2 ）试剂： 1mg/mL 葡萄糖标准液： 准确称取 100mg 分析纯葡萄糖 (预先在 80 ℃烘至 恒重 )，置于小烧杯中，用少量蒸馏水溶解后，定量转移到 100mL 的容量瓶中，以蒸馏水定 容至刻度，摇匀，置冰箱中保存备用； 3，5-二硝基水杨酸试剂： 3，5-二硝基水杨酸