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非结核分枝杆菌病实验室诊断专家共识(2016中华医学会结核病学分会)
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非结核分枝杆菌定义
非结核分枝杆菌( non-tuberculous Mycobacteria, NTM):也曾称为非典型分枝杆菌 (Mycobacteria other than tuberculosis, MOTT), 是指除结核分枝杆菌复合群 (mycobacterium tuberculosis complex, MTC)和麻风分枝杆菌以 外的分枝杆菌。
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NTM 的细菌学特点
NTM 的细菌学特点与结核分枝杆菌(MTB)类似, 属于需氧菌,细胞壁富含脂质使其具备抗酸染色的 特点,由于细胞壁疏水性强不利于水溶性营养物质 和药物进入,因此细菌能对抗各种去污剂。
NTM 在 环境中普遍存在,以土壤和水中最为常见,水源性 NTM 与人类感染的关系最为密切。
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NTM 分类
分类
分类依据
常见类别
治疗
快 生 长 分 枝 杆 菌 (rapidly growing mycobacteria,RGM)
固体培养基上培养 7 d 内即获 得肉眼可见菌落
脓肿分枝杆菌、
偶 然分枝杆菌
龟分枝杆菌
大环 内酯类、
氨基糖苷类
氟喹诺酮类
慢生长分枝杆菌(slowly growing mycobacteria,SGM)
而 SGM 则需要 7 d 以上
鸟分枝杆菌复合群(鸟分枝杆菌和胞内分枝杆菌)
堪萨斯分枝杆菌复合群
蟾蜍分枝杆菌等复合群
大环内酯类
利福 霉素类药物,
有时候加用注射类抗结核药物
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NTM易感人群
NTM 在 环境中普遍存在,以土壤和水中最为常见,水源性 NTM 与人类感染的关系最为密切。
较多机 会吸入水雾的人员,如室内游泳池管理员、操作淬 火过程的炼铁工人、桑拿浴爱好者等,发生 NTM 感 染的可能较大。
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我国 NTM 的流行病学状况
我 国 NTM 感染呈现
南方多于北方
气候温和地区多 于气候寒冷地区
沿海地区多于内陆地区;
目前缺乏 NTM 在人与人间传播的充分证据,因 此对感染者没必要进行隔离。
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常用的 NTM 鉴定方法
现阶段临床常用的鉴定方法依据鉴别能力分 为两大类:
仅能鉴别 MTC 和 NTM 的初步菌种鉴定 方法;
能够将 NTM 鉴别至种水平的菌种鉴定方法。
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初步菌种鉴定方法一
对硝基苯甲酸(PNB)选择性培养基法:在我 国广泛开展。绝大多数的 NTM 菌种在含有 500 mg/L PNB 的罗氏培养基上能够生长,而 MTC 却不能耐受。
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常用的 NTM 鉴定方法二
MPT64 抗原检测法:MPT64 抗原是 MTC 在液 体培养基中生长时主要分泌的蛋白之一,NTM 培养 滤液中多不存在此分泌蛋白,由此可以进行初步菌 种鉴定。
具有操作简单、用时短等优点。
很高的敏感度和特异度(超过 97%)。
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常用的 NTM 鉴定方法三
核酸扩增试验:即通常所说的聚合酶链反 应(PCR)技术。是 MTC 中特 异性的 DNA 序列。对于涂片阳性或是培养阳性的本,平行的 PCR 扩增获得阳性结果提示样品中存 在 MTC 菌,反之,当 PCR 为阴性结果时,应考虑存 在 NTM 的可能。
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NTM 菌种鉴定主要包括 2 大类方法:
比较同源基因或序列差异的分子诊断技术
分析细菌菌体组成 成分差异的鉴定技术。
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(三)实验室 NTM 筛查推荐流程
临床标本
AFB图片阳性
分支杆菌培养阳性
针对MTC的PCR检测
菌种鉴定
阳性支持为MTC
可能为NTM
分支杆菌培养
菌种鉴定
NTM分离率较高地区
NTM初筛实验
菌种鉴定
菌种鉴定
临床标本
分支杆菌培养阳性
NTM初筛试验
菌种鉴定
支持NTM
NTM分离率较低地区
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NTM 的临床相关性
由于 NTM 广泛分布于环境之中,因此从临床样 本中分离出 NTM 并不一定提示 NTM 病,必须排除 样本污染和细菌定植的可能。
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