分子生物学六基因重组.pptx

Chapter 6 ;遗传重组;分子内重组;一、同源重组;修复损伤DNA的同源重组;真核生物同源重组的断裂与重接模型;Diploid eukaryotes: crossing over ( 双倍体染色体交换);同源重组;染色体的重组包含局部的物理性的改变：破损与再联合;同源染色体两对DNA双链在相应点产生nick，一条单链离开它的伙伴，与另一个双链分子的相应位置倒易位置，创造了两个DNA双链之间的连系，这种连接在一起的一对双链叫做交差分子。 一个链与另一个链的连接点叫做重组关节。;重组关节能沿着DNA双链分子移动，这种移动叫做枝状迁移 在一??链被另一条链取代的过程中，分叉点可以沿任一个方向移动;交差分子旋转后形成一个平面结构------Holliday结构;细菌基国重组中的单链同化作用 single-strand assimilation;RecA催化单链的同化作用;RecA promotes the assimilation of invading single strands into duplex DNA so long as one of the reacting strands has a free end. ;RecA介导的DNA修复;重组热点;Chi序列刺激它周围附近的重组;RecBCD是有强烈降解DNA能力的核酸酶，在SSB存在下，有解开DNA双链的酶活性和ATP酶活性，它在重组中所起的作用便是提供带有自由3’端的单链DNA。;;Haploid prokaryotes (单倍体生物原核同源重组〕;3. RecA-ssDNA filaments search the opposite DNA duplex for corresponding sequence (invasion).;Haploid prokaryotes (原核同源重组〕;二、位点专一性重组;;整合过程要求在attp和attB之间进行识别；而移除过程那么需要在attL和attR之间进行识别 重组过程是可逆的，但反响条件不同：整合反响需要int产物和IHF因子；移除反响还需要噬菌体xis基因产物。 xis基因产物决定噬菌体是否进行复制; 整合的过程: ;位点专一性重组的核苷酸序列;特异性重组可以在体外进行;通路克隆系统gateway cloning system;LR反响和BP反响;PCR产物的BP反响;三、转座重组;转座子;IS element;基因组的进化既赖于获得新的序列又赖于重排目前的序列。 转座子可引起其它基因组顺序的重排，提供基因组里变异的主要来源。重排可以产生新的序列和改变目前序列的作用。 细菌、噬菌体、病毒(尤其是逆转录病毒) 可以通过传染传递遗传信息。;转座子的特征性结构是它的末端具有反向重复序列，而两侧宿主DNA的邻接末端是短的同向重复序列。 当考查DNA序列时，这种结构类型是判断转座子的鉴别特征，并且是这种序列起源于转座作用的初步证据。 ;转座因子IS;Tn10 插入环状DNA内;Nonreplicative transposition describes the movement of a transposon that leaves a donor site (usually generating a double-strand break) and moves to a new site.Replicative transposition describes the movement of a transposon by a mechanism in which first it is replicated, and then one copy is transferred to a new site.;转座产生的效应;转座产生的效应;Transposition is initiated by nicking the transposon ends and target site and joining the nicked ends into a strand transfer complex. ;Transposition may fuse a donor and recipient replicon into a cointegrate共合体. Resolution releases two replicons复制子, each containing a copy of the transposon. ;断裂重接那么造成非复制转座Nonreplicative transposition proceeds by breakage and reunion ;Each controlling element