植物叶绿素含量测定丙酮乙醇混合液法.pptx

植物叶绿素含量测定丙酮乙醇混合液法第1页/共34页主要内容一、园艺植物光合作用分析技术二、园艺植物与土壤中痕量元素的测定－原子吸收分析法三、园艺植物与土壤中氮磷的测定－连续流动分析法差异四、园艺植物芳香物质分析－气相色谱、质谱分析技术五、糖类（激素）分析技术－液相色谱分析法六、蛋白质分离纯化－柱层析分析技术七、蛋白质分离鉴定－双向电泳分析技术八、园艺植物组织切片与显微观察技术第2页/共34页第一章 植物光合与荧光生理指标的测定本章的主要内容第3页/共34页（一）园艺植物光合指标的测定（二）园艺植物荧光指标的测定 第4页/共34页1、植物光合作用原理及常规测定方法2、LI-6400光合作用系统构成原理及测定内容3、LI-6400光合作用系统在测定过程中常见问题及解决方法实验一 使用LI-6400光合作用系统测定园艺作物光合生理指标实验二 使用LI-6400光合作用系统进行园艺作物光合CO2响应曲线的测定第5页/共34页1、植物光合荧光作用原理及常规测定方法2、LI-6400荧光系统测定作物荧光指标的方法3、影响作物荧光的因素及测定中的注意事项实验三 使用LI-6400荧光系统测定作物光化学效率实验四 使用LI-6400荧光系统测定作物电子传递速率与光化学猝灭一、光合作用测量的理论基础第6页/共34页 绿色植物吸收阳光的能量，同化CO2 和H2O，制造有机物并释放氧的过程，称为光合作用。光合作用所产生的有机物质主要是糖类，贮藏着能量。 CO2 + H2O → （CH2O） + O2 可见，测定公式中任一反应物的消耗速率或产物的生成速率（包括物质的交换和能量的贮藏）都可以用来计算净光合速率（Pn）。第7页/共34页净光合速率（Pn）的测定方法（1）根据有机物的积累速率，主要有半叶法、植物生长分析法；（2）根据CO2 及O2 体积的变化，主要有微量定积检压法；（3）根据O2 浓度的变化，主要有氧电极法；（4）根据CO2浓度的变化：酸度法、碱吸收法、14C 标记法、红外气体分析法、微气象法。 目前，最常见的方法是红外气体分析法。二、LI-6400光合作用测量系统 第8页/共34页LI-6400是美国LI-COR公司的第三代气体交换测量系统主要特点：（1）开路式系统，保证了叶室内外环境条件的一致与同步变化，同时保证了被测量叶片的环境因子的稳定；（2）CO2/H2O 分析器位于传感器的头部，消除了气体交换测量的时滞；（3）可自动或手动控制叶室内部的环境条件（CO2浓度、光照强度、相对湿度、温度等），方便地进行环境条件控制下光合速率的测定以及响应曲线的测定。（4）具有多个自动测量程序，如光响应曲线、CO2 响应曲线、光诱导曲线、光呼吸曲线、荧光CO2 响应曲线、荧光光响应曲线、荧光动力学曲线、荧光循环曲线等。（5）叶室小，结构简单，操作方便。（一）硬件部分第9页/共34页主机控制器电缆线外置光量子传感器IRGA（红外分析器）或叶室（二）实验室配置第10页/共34页叶室配置标准叶室荧光叶室土壤叶室第11页/共34页附件CO2注入系统LED红／蓝光源第12页/共34页1、LED红／蓝光源1）.可以提供0～2000μmol· m-2 ·s-1之间的任意光照强度2）.产热极少，基本不对测量叶片的环境条件产生影响。3）.LED红/蓝光源不仅提供红色光（影响光合作用的最主要光照），也提供蓝色光（控制气孔开放的最主要光）。红色光的波长为665nm，蓝色光的波长为470nm。蓝色光是研究气孔动力学的关键。 第13页/共34页2、CO2注入系统1). CO2浓度是通过把精确控制的纯CO2注入到已过滤了CO2的空气中来得到的。 2).可以确保高浓度CO2条件下的测量, 生成完整的标准A-Ci曲线.3).在系统软件控制下,设定所需CO2浓度, 或者使用AutoPrograms(自动程序模式)自动测量一系列不同浓度的数据.4).可以提供8小时高达2000 μmol mol-1的CO2气体 第14页/共34页（三）工作原理LI-6400是气体交换测定系统。光合作用与蒸腾作用的测量是基于流经叶室的气流中CO2和H2O差异。 第15页/共34页 开放式气路系统是以气泵为动力，空气流经同化室后排出，由于叶片光合气体中的CO2被部分吸收，用IRGA测量进入同化室和流出同化室的空气中CO2浓度差，并按下式计算出光合速率： Pn=F×△C/S 式中：Pn-光合速率；F-气体流量；△C-同化室进气口与出气口CO2浓度差；S-叶片面积。（四）LI-6400便携式光合作用仪功能第16页/共34页测量参数和计算参数第17页/共34页可计算光合作用指标第18页/共34页表观量子效率（AQY）：指-2.s-1低光强下光－光合作用最初直线方程的斜率。羧化效率（CE）：又称叶肉导度，是在CO2