引物二聚体的形成.pdf

什么是引物二聚体？怎样消除引物二聚体? 是引物的3端间相互错配扩增形成的。引物二聚体的出现是必然的，只是或多或 少的问题，电泳时看不到引物二聚体带也不代表没有二聚体出现，只是含量低我 们 的肉眼看不到而已。提高PCR严谨性(包括提高退火温度，降低引物浓度等) 可大大降低二聚体的浓度。 减少PCR产物中引物二聚体的方法: 1从引物自身 着手，重新设计引物，这是最根本解决这一问题的办法; 2.可能模板有问题;模板浓度过小，适当加大模板量; 3.Taq酶，引物，Mg2+浓度可能过高，可 降低它们的浓度; 4.取你所要加的上下游引物混合后，在100摄氏度下的沸水中煮5分钟，然后迅