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生物化学实验教学大纲 生物化学实验教学大纲 PAGE 生物化学实验教学大纲 湖北大学 生物化学实验 （课程代码） 实验教学大纲 （第2版） 生命科学学院 生化教研室 2010年7月 前 言 课程名称：生物化学 实验学时：64 适用专业：生物科学、生物技术、生物工程 课程性质：必修 实验课程简介 生物化学实验课程是生命科学本科实验教学的一个重要组成部分，实验性质有基础性、综合性、设计（创新）性三层次，实验项目数共25个，按照学时要求完成必做与选做实验。在实验过程中要求学生自己动手，独立观察并完成实验报告，注重培养学生创新思维与能力。 二、课程目的 通过实验教学可以加强学生对生物化学基本知识和基本理论的理解，掌握现代生物科学与技术的实验原理与技能；同时，通过实验培养学生独立观察、思考和分析问题、解决问题和提出问题的能力，养成实事求是、严肃认真的科学态度，提高学生的科学素养以及敢于创新的开拓精神。 三、考核方式及成绩评定标准 生物化学实验课程考核采用笔试与操作能力二种方式； 期末成绩评定标准为：平时成绩60%；笔试10%；操作能力30% 。 四、实验指导书及主要参考书 陈均辉等，《生物化学实验》科学出版社，2003年4月第三版 蒋立科等，《生物化学实验设计与实践》高等教育出版社， 2007年10月 第1版 五、实验项目 实验项目一览表 序号 实验项目名称 实验类型 实验学时 必做/选做 实验一 蛋白质及氨基酸的呈色反应与甲醛滴定法测定氨基氮 验证性 3 必做 实验二 氨基酸的分离鉴定――纸层析法 验证性 3 必做 实验三 醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白 验证性 3 必做 实验四 双缩脲法测定蛋白质浓度 验证性 3 必做 实验五 酪蛋白的制备与定量测定 综合性 4 必做 实验六 影响酶促反应的因素 验证性 3 必做 实验七 枯草杆菌蛋白酶活力的测定 验证性 3 必做 实验八 米氏常数的测定 验证性 3 选做 实验九 维生素C的定量测定 验证性 3 必做 实验十 核黄素的荧光光度定量测定 验证性 3 必做 实验十一 植物组织中蔗糖酶的提取与酶活力测定 综合性 5 选做 实验十二 紫外分光光度法测定核酸含量 验证性 3 选做 实验十三 腺苷三磷酸的测定（电泳法） 验证性 3 选做 实验十四 酵母核糖核酸的提取、鉴定与定量分析 综合性 5 必做 实验十五 糖的旋光性和变旋现象 验证性 3 必做 实验十六 还原糖的测定—3，5-二硝基水杨酸法 验证性 3 必做 实验十七 脂肪酸的β—氧化作用 验证性 3 必做 实验十八 大豆中粗脂肪含量测定和组分分析 综合性 5 选做 实验十九 卵磷脂的提取、鉴定与定量测定 综合性 5 必做 实验二十 阳离子交换树脂摄取氯化钠 验证性 3 必做 实验二十一 离子交换柱层析法分离氨基酸 综合性 4 必做 实验二十二 发酵过程中无机磷的利用 综合性 4 必做 实验二十三 乳酸脱氢酶活力测定 综合性 4 选做 实验二十四 凝胶过滤法测定蛋白质分子量 综合性 4 选做 实验二十五 脂蛋白的分离与鉴定—琼脂糖电泳 综合性 4 选做 合计 64 实验类型：演示性、验证性、综合性、设计性、其它 实验一 蛋白质及氨基酸呈色反应与甲醛滴定法测定氨基氮（3课时） 实验类型：验证性 实验目的： 学习几种常用的鉴定蛋白质与氨基酸的方法，掌握甲醛滴定法测定氨基酸含量的原理和操作要点。 实验内容： 1、茚三酮反应： （1）取两支试管分别加入蛋白质和氨基酸溶液1ml，再各加茚三酮水溶液，混匀，沸水浴加热1-2min，观察颜色由粉色变紫红再变蓝。 （2）在一小块滤纸上滴上一滴%Gly溶液，风干后，再在原处滴上一滴%的印三酮乙醇溶液，在微火旁烘干显色，观察紫红斑点的出现。 2、黄色反应： 向7个试管中分别按下表加入试剂，观察各管出现的现象，有的试管反应慢可略放置或用微火加热。待各管出现黄色后，于室温下逐滴加入10%氢氧化钠溶液至碱性，观察颜色变化。 管 号 1 2 3 4 5 6 7 材 料 （滴） 鸡蛋清 溶液4 大豆 提取液4 指甲 少许 头发 少许 % 苯酚4 % 色氨酸4 % 酪氨酸4 浓硝酸（滴） 2 4 40 40 4 4 4 3、甲醛滴定 （1）标准Gly溶液的滴定。 （2）计算： Gly氨基氮的回收率%=实际测得量∕加入理论值×100% 4、未知浓度Gly溶液的滴定 氨基氮（mg/ml）=（V未—V对）×NNaOH× 实验要求： 要求仔细观察并记录实验现象，如颜色等变化，分析实验结果。 实验二 氨基酸的分离鉴定――纸层析法（3课时） 实验类型：验证性 实验目的： 学习分配层析的原理；掌握氨基酸纸层析法的操作技术要点；以及氨基酸的呈色反应原理。 实验内