MMFSCNJ出口食品中沙门氏菌辛酯酶荧光检验方法.pdf

MM_FS_CNJ_0348出口食品 沙门氏菌（辛酯酶荧光） MM_FS_CNJ_0348 出口食品中沙门氏菌（辛酯酶荧光）检验方法 1. 适用范围 本方法适用于出口肉品，蛋品沙门氏菌的检验，其他食品可参照使用。 2. 定义 MUCAP：4－methylumbelliferyl －caprylate （4－甲基伞形酮辛）的缩写。 MUCAP试剂：用 4 －甲基伞形酮辛酯配成的试剂的缩写。 SS琼脂：沙门氏菌和志贺氏菌琼脂培养基。 HE琼脂： Hektoen Enteric 琼脂培养基。 3. 主要试剂和仪器 . 主要试剂（包括培养基） 培养基与试剂按 SN 0170 第 5 章，另补充以下部分： SS琼脂培养基（含 1％蔗糖）：见附录 A1； HE琼脂培养基：见附录 A2； MUCAP试剂：见附录 A3； 氧化酶试纸：见附录 A4； . 仪器 紫外光灯：波长 366nm，功率＞ 6W； 放大镜： 3～4X； 毛细滴管。 4. 样品制备及增菌培养 参照 SN 0170 进行。 5. 分离培养 . 将增菌培养液摇匀，挑取一接种环，划线接种于 SS和 HE琼脂培养基各一个， 于 36±1℃培养 24±2h。 . 观察各琼脂平板上有无可疑沙门氏菌菌落。如无可疑菌落，应再继续培养 24± 2h 。沙门氏菌的菌落特征见表 1。 表 1. 沙门氏菌属菌落特征 菌 落 特 征 SS 平板 HE平板 圆形，边缘整齐；淡黄色，半透明，有或无 圆形，边缘整齐；蓝绿色至蓝色，有或无黑色 黑色中心；周围培养基透明淡黄色 中心；周围培养基透明墨绿色 6. 过程简述 . 从培养的分离培养基上选可疑沙门氏菌菌落（尽量选较大，分离较好的单个菌 落），用玻璃笔做好标记并编号。 . 用毛细滴管吸取 MUCAP试剂，加一滴于编号的菌落上，待一个平板的被检菌全 部滴加试剂后， 将平板拿至 366nm紫外光灯下检视。 发蓝色荧光的为 MUCAP试验 阳性，将阳性菌落号记录下来。 . 用接种环挑取荧光反应阳性菌落， 涂于氧化酶试纸上， 观察涂菌点是否变蓝色。 于 10min 内变蓝色为氧化酶试验阳性；不变色为阴性。 7. 结果计算 试验阴性的样品，报告为“未检出沙门氏菌”。 试验阳性氧化酶试验阴性的样品， 按 SN0170 第四章继续进行生化和血清学试验， 并根据试验结果报告。 8. 来源： SN 0332－94 附 录 A 培养基和试剂 （补充件） 琼脂培养基（含 1％蔗糖） 牛肉浸膏 胆盐 煌绿 蛋白胨 柠檬酸钠 中性红 乳糖 硫代硫酸钠 琼脂 蔗糖 柠檬酸铁 蒸馏水 1000mL 将各成分溶于水，煮沸 4～5min 。最终±。冷至 55～66℃，倾注平板。 琼脂培养基 月示.蛋白胨 水杨素 柠檬酸铁铵 酵母浸出物