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同一品种不同产地宁夏枸杞DNA指纹图谱特征研究
目录
TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1
正文 1
文1:同一品种不同产地宁夏枸杞DNA指纹图谱特征研究 2
1 材料 3
2 仪器与试剂 3
3 方法 4
4 结果与分析 5
5 讨论 5
文2:不同产地重楼的HPLC指纹图谱研究 6
1 材料与方法 8
1.1 材料 8
1.2 试验条件选择 9
1.3 供试品溶液制备 10
1.4 色谱条件 10
1.5 方法学考察 10
1.6 指纹图谱的数据处理 11
2 结果与分析 12
2.1 试验条件的确定 12
2.2 重楼指纹图谱的建立 12
2.3 方法学评价 13
2.4 指纹图谱的数据分析 14
3 讨论 15
参考文摘引言: 16
原创性声明(模板) 17
文章致谢(模板) 17
正文
同一品种不同产地宁夏枸杞DNA指纹图谱特征研究
文1:同一品种不同产地宁夏枸杞DNA指纹图谱特征研究
Studies on the DNA Fingerprints of Lycium barbarum L. from Different Area
Abstract:ObjectiveTo study the DNA fingerprints of Lycium barbarum L. obtained from different areas. MethodsDNA fingerprints of samples of leaves and fruits of Lycium barbarum L. from four large commercial cente were examined by RAPD. ResultsAll leaves of Lycium barbarum L. showed similar fingerprints characteristics, while the fruits of Lycium barbarum L. gave coiderable different results. ConclusionDNA fingerprint study is reliable for identifying Lycium barbarum L.
Key words: Lycium barbarum L.; RAPD; DNA fingerprint
用任意引物进行基因组指纹分析是检测DNA多态性的一种通用方法,这种方法是用随机选择的引物在一定反应条件下产生DNA指纹,这样获得的指纹有的只包括几个主要的聚合酶链反应(polymerase chain reaction,简称PCR)产物,有的则包括100多个,这样的产物通常被称为随机扩增的多态性DNA(Random Amplified Polymorphic DNA,简称RAPD)。RAPD由Williams和Welsh两个研究小组几乎同时于1990年建立起来的一项DNA分子标记技术[1,2],其原理是:它以一个10碱基的任意序列的寡核苷酸片段为引物在未知序列的基因组DNA上进行随机的PCR扩增,这种被DNA聚合酶调节的扩增是一个复杂的、动态的化学反应系列;在这些反应中引物将同源序列从非同源的竞争位点识别出来并确定以后的效率,模板、扩增产物、酶、引物与dNTPs浓度之间的平衡随每个温度周期而变,不同种类的分子彼此相互作用,其结果是合成了PCR扩增产物;在基因组上,某一引物可能会与单链DNA的多个位点结合,但只有这些引物的位置是在彼此可扩增的距离内(200~4 000 bp),一组不连续的分子量为200~4 000 bp的DNA片段就会通过PCR产生;如果双链DNA分子在一定长度内具有反向平行又与引物互补的片段,那么经过40个循环后就可以合成240条新链,如此高产的DNA片段经电泳分离和溴化乙锭专一染色后可直接在紫外光下观察和照相,记录下RAPD指纹[3]
前文已报道过RAPD法对枸杞叶片基因组DNA进行指纹图谱分析[4]。本文在此基础上,对全国同品种不同产地宁夏枸杞主栽品种宁杞1号的DNA指纹图谱特征进行了研究。
1 材料
本实验采用了全国四大商品区的枸杞道地品种宁夏枸杞的主栽品种宁杞1号的叶片和宁夏商品区的制品枸杞子(表1),旨在探求同种药材不同产地及同一产地枸杞叶片、制品枸杞子的DNA指纹图谱特征。表1 实验材料(略)
2 仪器与试剂
PCR仪(PTC-200TM Peltier Thermal Cycler,M J Research,Inc,USA);电泳仪(DYY-10C型;北京六一仪器厂);
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