酪蛋白等电点实验.pptx

1;一、生物化学实验要求与实验室规则;3、实验前要认真预习，掌握实验的目的、 原理，熟悉操作步骤。听从老师的安排，不违规操作，注意自身安全。实验完成后要及时书写实验报告（实验名称、日期、目的、原理、步骤、结果、结果分析、思考题，文字简练、准确、认真，实验报告下一次实验课开始前上交，统一用实验报告纸）。 4、实验台面应随时保持整洁，仪器、药品摆放整齐。公用试剂用完后，应及时复原。实验完成后，仪器洗净并放回原处，将实验产生的垃圾打扫干净，方可离开实验室。 ;5、注意节约药品、试剂；洗涤和使用仪器时要小心仔细，防止损伤仪器及造成自身伤害；发现仪器故障应立即报告老师，不可擅自动手检修。 6、严禁在实验室吸烟、喝水、吃东西。 7、每次实验课结束，由班长负责安排值日生，负责打扫实验室卫生。 ;二、生物化学实验的基本操作;（2）定容分析器皿（如吸量管、量筒等） 比较干净的，直接去离子水冲洗即可；否则用铬酸（酸性和氧化性）洗液浸泡，自来水和蒸馏水冲洗。 （3）粘附有血浆的刻度吸管清洗 45%尿素浸泡或1%氨水浸泡后，再稀盐酸浸泡，对于顽固污垢可再次采用重铬酸钾溶液浸泡。;（二）常用器材的使用方法 1、吸量管种类和使用 （1）种类：移液管、奥氏吸管和刻度吸管;;（2）刻度吸管的使用 使用前：①?吸管无破损且干净；②选取合适的量程；③观察有无“吹”字：若有，说明刻度到尖端，放液后需将尖端的溶液吹出，否则不吹。 握法：拇指和中指夹拄吸管，食指游离。? 取液：①垂直入液?，且入液深度适中；② ?吸耳球吸取液体，并使液高高于待量刻度2-3cm； ③ ?食指按紧吸管上端，并提离液面、观察液内有无气泡。 放液至刻度：刻度吸管垂直，右眼与刻度线平行，轻轻松开食指（转动刻度吸管），使液面缓慢降低，直至最低点与刻度线相切。? 放液至容器：刻度吸管垂直，容器倾斜45℃，使溶液自然流入容器，注意吹与不吹。 注意：一根吸管只吸取一种试剂；严禁用嘴吸。;2、自动移液器的使用 ;移液器使用方法和注意事项; （6）移液枪在每次实验后应将刻度调至最大，让弹簧???复原型以延长移液枪的使用寿命 ?（7）移液枪校正?：可用分析天平称量所取纯水的重量并进行计算的方法，来校正取液器，1mL?蒸馏水20℃时重0.9982g.? （8）移液器严禁吸取有强挥发性、强腐蚀性的液体（如浓酸、浓碱、有机物等）。? （9）严禁使用移液器吹打混匀液体。? （10）不要用大量程的移液器移取小体积的液体，以免影响准确度；?同时，如果需要移取量程范围以外较大量的液体，请使用移液管进行操作。 ?（11）如液体不小心进入活塞室应及时清除污染物；定期清洁移液枪外壁，可以用95%酒精或60%的异丙醇，再用蒸馏水擦拭，自然晾干。 ;3、溶液的混匀、过滤及离心 （1）混匀的目的：使反应体系内的各种物质分子很好的相互接触，充分的进行反应；使欲稀释的溶液成为浓度均一的溶液。 （2）常用的混匀方式?：腕混匀、指弹混匀、吹吸混匀、搅拌混匀、磁搅拌混匀、涡旋器混匀等。 （3）混匀注意事项：防止液体溅出，严禁用手指堵塞容器口。 （4）过滤：收集滤液、沉淀或洗涤沉淀。? ;三、分光光度法;;;（一）分光光度法;（二）分光光度法的原理;Beer（比尔）定律;Lambert-Beer（朗勃-比尔）定律;（三）如何求被测组分的含量;（1）利用标准管计算测定物的含量;（2）利用标准曲线计算测定物含量;标准曲线（浓度-吸光度曲线）;（四）分光光度计的基本结构;;分光光度计使用的注意事项;病原菌多基因调控机制研究;实验目的;实验原理; 本实验观察酪蛋白在不同pH溶液中的溶解状态以测定其等电点。以醋酸和酪蛋白溶液中的醋酸钠构成各种不同pH值的缓冲液，在某种溶液中，酪蛋白溶解度最小时，该溶液的pH值就是酪蛋白的等电点。;（三）实验材料 器材：200和1000μL可调移液枪、试管、试管架、刻度吸管等 试剂：、和乙酸 5g/L的酪蛋白-醋酸钠溶液 ;（四）操作步骤;（五）注意事项 ;感谢您的观看！