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抗肺癌合剂对Lewis肺癌的抑制作用及VEGF表达的影响 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：抗肺癌合剂对Lewis肺癌的抑制作用及VEGF表达的影响 1 1 材料与方法 2 2 结果 4 3 讨论 5 文2：异种VEGF融合蛋白疫苗对小鼠Lewis肺癌的抑制作用 6 1 材料和方法 6 2 结果 9 3 讨论 11 参考文摘引言： 12 原创性声明（模板） 14 文章致谢（模板） 14 正文 抗肺癌合剂对Lewis肺癌的抑制作用及VEGF表达的影响 文1：抗肺癌合剂对Lewis肺癌的抑制作用及VEGF表达的影响 Abstract： ［Objective］ To study the effect on the growth of mouse Lewis lung carcinoma and on the expression of VEGF in tumor tissue. ［Methods］ C57BL/6 mice were inoculated the Lewis lung carcinoma cell at right armpit and divided into groups. Different groups were administered by MAALC (low, normal and high dose), CTX or saline. After 15 days, all mice were put to death to detach the tumo then weighed them. After that, we treated tumor tissue with VEGF immunohistochemistry stain, detected the integral optical deity of VEGF expression with image analytical technique. ［Results］ Compared with model group, the average weight and VEGF expression level of the tumo of the high dose group were less and statistically significant (P). ［Conclusion］ MAALC can restrain the growth of Lewis lung carcinoma，and can degrade the expression level of VEGF in tumor tissue. Key words: lung neoplasms; VEGF; TCM therapy 肺癌是目前最常见的恶性肿瘤，近年其发病与死亡呈明显上升趋势，严重危害人民健康，对其防治任重道远。诸多研究表明，中医药在抗肿瘤生长与转移，对放化疗的增效减毒，提高机体免疫功能，改善症状、提高生存质量上有其自身的优势。抗肺癌合剂是周维顺教授通过长期临床实践创立的经验方，主要用于肺癌病人，并在临床使用中取得了较好的疗效，为进一步验证其效果，并初步探讨其可能的作用机制，本研究从动物实验角度, 观察抗肺癌合剂对C57BL/6小鼠Lewis肺癌的抑制作用，并从分子水平观察其对肿瘤组织VEGF表达的影响。 1 材料与方法 实验动物 六周龄C57BL/6近交系小鼠50只，雌雄各半，体重（±）g，清洁级，均由浙江中医药大学实验动物中心代购。Lewis肺癌瘤源小鼠由浙江省中医药研究院馈赠。 实验药物和试剂 抗肺癌合剂（白花蛇舌草、半枝莲、猫人参、猫爪草、野荞麦根、生黄芪、北沙参等16味中药组成）水提取至高剂量组浓度为每毫升含生药3g，4℃冰箱保存备用。中剂量、低剂量组临用时由高剂量组用蒸馏水稀释至浓度为每毫升分别含生药 g和 g。注射用环磷酰胺（江苏恒瑞医药股份有限公司，200mg/支，批号：）用时以生理盐水临时配制成浓度为2 mg/ml。小鼠抗鼠VEGF单克隆抗体、PV6001/6002 PowerVisionTM TwoStep免疫组化染色试剂盒、ZLI9032浓缩型DAB试剂盒（购自北京中杉金桥生物技术有限公司） 实验造模 参照 文献 ［1］造模，将接种Lewis肺癌的瘤源小鼠脱颈椎处死，消毒后置于超净台上，剪开小鼠腋下皮肤，取新鲜肿瘤组织并剪成约1mm3碎块，置于匀浆器中研磨，并以200目滤膜过滤到无菌烧杯内，加生理盐水稀释成1:3的瘤细胞悬液。用移液枪吸取细胞悬液约20μl置于无菌试管内，用生理盐水稀释100倍，加%台盼兰染色后