电针内关神门预处理对急性心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞尾加压素Ⅱ的影响临床医学.doc

电针内关神门预处理对急性心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞尾加压素Ⅱ的影响临床医学 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：电针内关神门预处理对急性心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞尾加压素Ⅱ的影响临床医学 1 1 材料和方法 2 2 实验结果 4 3 讨论 5 文2：电针人中内关对急性脑缺血大鼠血清一氧化氮的影响临床医学 6 1 材料与方法 7 2 结果 8 3 讨论 8 参考文摘引言： 9 原创性声明（模板） 11 文章致谢（模板） 11 正文 电针内关神门预处理对急性心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞尾加压素Ⅱ的影响临床医学 文1：电针内关神门预处理对急性心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞尾加压素Ⅱ的影响临床医学 本实验观察了电针“内关”、“神门”对心肌缺血再灌注大鼠缺血心肌细胞内尾加压素Ⅱ含量的影响，为进一步探讨针刺预处理的心肌保护和针刺“治未病”理论提供实验依据。 1 材料和方法 实验动物及分组 同等条件下饲养健康成年雄性SD大鼠80只，体质量（220±20）g(安徽全椒实验动物有限公司提供，合格证号：(99)量认（苏）字(Z0582)号)。随机分为4组，分别为正常对照组、I/R模型组、针刺预处理组、UII特异性受体拮抗剂组，每组20只。 试剂和仪器 UII检测试剂盒（UNIONHONEST#ADL，批号：110D2356）；BIOPAC十六导生理纪录仪（美国加州产，11A2055系列）；全自动生化分析仪（丹麦DAKO公司）；PCE－A型程控电针 治疗 仪（安徽天恒科技实业有限公司）；DY89Ⅱ型电动玻璃匀浆机（宁波新芝生物科技有限公司）；TGL16高速离心机（江苏省金坛市荣华仪器制造有限公司） 实验条件 动物于安静的环境下分笼饲养，室温控制在22±1℃（空调）的范围内，相对湿度60%左右， 自然 光照，塑料笼内以消毒木屑为垫料，食水自取。 模型处理方法 正常对照组同等条件下饲养，不做其它任何处理；模型对照组同等条件下饲养，3天后直接造模，不做其他处理；针刺预处理组和拮抗剂组每天电针1次，连续3d。第3天针刺结束后即刻造模。 急性心肌缺血模型复制和评定 模型复制前先记录正常时心电图，心电图异常者淘汰不用，心电图记录采用针形电极插入大鼠四肢皮下，常规连接Biopac多道生理记录仪，记录标准Ⅱ导联ECG。 大鼠用乙醚麻醉后，固定，沿胸骨左缘剪开皮肤，用止血钳游离大鼠左侧的胸大肌，暴露左第3、4肋，可以清晰的看到心脏的暗影，用弯头止血钳沿胸骨左缘3、4肋间穿透胸膜，挤出心脏，用4/0医用缝合线在冠状动脉左前降支挂线，然后迅速将心脏送回胸腔，医用缝合线的两端留置体外备用。用长嘴止血钳把胸部皮肤和肌肉以及心脏挂线夹紧，防止气胸，观察心电图变化，T波高耸或者倒置为心肌缺血标志，如心电图改变不明显，则稍稍松一点止血钳，拉紧一端线头，这时则可以明显的看到心电图改变，30min后，再灌注时，松开止血钳，形成再灌注损伤模型。从开胸到关闭胸腔，控制在1min以内完成。根据模型复制前后心电图变化情况初步判断、评价心肌缺血大鼠模型复制成功与否。 穴位及电针参数选择 “神门”“内关”穴位的定位参照《大鼠穴位图谱的研制》［1］。根据以往的实验研究结果， 参考 《实验针灸学》每天定时将电针组和拮抗剂组大鼠放入固定器中，选取“神门”，“内关”穴，酒精消毒所取穴位，寸毫针，直刺1mm，接通电针仪，给与电针刺激，刺激参数为：刺激电压5V，电流强度1～2mA，频率为2Hz，波宽300μm，正负向交替方波刺激，每次30min，1次/d，电针3d。第三天针刺后进行造模，约距第一次针刺时间48～50h。 标本取材及检测 模型复制成功后24h，10％水合氯醛（/100g体质量）腹腔注射麻醉大鼠，腹主动脉真空管采血，离心，选取上层血浆，即刻标记放入液氮冷藏保存；同时取大鼠左心室心尖部缺血区心肌组织，称重，按照1∶9的比例加入生理盐水，匀浆，离心，选取上清液，治成10%的组织溶液，标记放入液氮冷藏保存待测。严格按照试剂盒操作规范，用ELASE方法测量心肌组织液中的UП含量。 统计学处理 实验数据采用均数±标准差（x+s）表示，各组间均数比较采用单因素方差分析（Oneway ANOVA），组间均数的两两比较采用q检验(NewmanKeuls test)法，P有统计学意义。数据的处理采用SPASS for 软件分析。 2 实验结果 心电图变化 取材前心电图比较结果显示：正常组大鼠心电图完全正常；模型组出现明显心肌缺血的表现；电针组和拮抗剂组大鼠的心电图比模型组均有所改善。见图1。 图1 各组心电图变化（略） 针刺抗I/R模型大鼠缺血区心肌组织UII含量的影响,见表1、图2。