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第五节 定性和定量分析方法 (3)标准加入法。已知试样溶液基本组成,难以配制相同介质的标准溶液,可先测量试样溶液的吸光度(A样),然后向试样中加入一小体积(Vs)、高浓度(cs)的待测物质标准溶液,再测其吸光度(A′样),由两次测得的吸光度以及加入标准溶液的量计算待测组分的浓度。计算公式为 (8-12) 式中,V总为所配溶液的体积。 此法可减小由于介质的不同所引起的误差。 第五节 定性和定量分析方法 【例8-2】 用吸光光度法测定血清中某离子M,取血清样5.00 mL,加入各试剂后稀释至10.00 mL,测得A=0.435,同样取血清样5.00 mL,加入0.50 mL 100 μg·mL-1的M标准溶液,加入各试剂后稀释至10.00 mL,测得A=0.835,求血清中M的含量(μg·mL-1)。 解:由式(8-12)得 血清中M的含量为 5.44×2=10.9 μg·mL-1 第五节 定性和定量分析方法 多组分定量分析 2. 由于吸光度具有加和性,可不经分离同时测定某一试样溶液中两个以上的组分。混合组分的吸收光谱相互重叠的情况不同,测定方法也不相同,常见混合组分吸收光谱相干扰情况有三种,如图8-3所示。 图8-3 常见混合组分吸收光谱相干扰情况 第五节 定性和定量分析方法 (1)两种吸光物质的吸收曲线相互不重叠或重叠很少,则可分别在λ1及λ2 处测定组分x及组分y的浓度。 (2)两种吸光物质的吸收曲线部分重叠。先用x、y的标准溶液求得εx(λ1 )、εx(λ2 )、εy(λ2 ),而后在λ1 处测得混合组分中x组分的吸光度Ax(λ1),求出cx,再在λ2 处测得混合组分的吸光度 Ax+y ,根据吸光度具有加和性,按下式即可求得cx和cy: 第五节 定性和定量分析方法 (3)两吸收曲线互相重叠,但服从朗伯-比耳定律。 若试样中需要测定两种组分,则选定两个波长λ1 及λ2 ,先用x、y的标准溶液求得εx(λ1 )、εy(λ1 )、εx(λ2 )、εy(λ2 ),测得试液的吸光度分别为 A1和 A2,则可解下面的方程组求得组分x、y的浓度cx、cy : 如果混合物含有 n 个组分,可不经分离,在 n 个适当波长处进行 n 次测量,获得 n个吸光度值,然后解 n 个联立方程以求得各组分的浓度。 第五节 定性和定量分析方法 【例8-3】 设有a和b两种组分的混合物。已知a组分在波长λ1和λ2处的摩尔吸光系数分别为1.98×103 L ·mol-1·cm-1和2.80×104 L ·mol-1·cm-1,b组分在波长λ1和λ2处的摩尔吸光系数分别为2.04×104 L ·mol-1·cm-1和3.13×102 L ·mol-1·cm-1,用1 cm比色皿,在λ1处测得总吸光度为0.301,在λ2处测得总吸光度为0.398。求a和b两种组分的浓度。 解:根据吸光光度的加和性原理,列方程为 代入数据得 解方程组求得 谢谢观看! 分析化学 第八章 紫外-可见吸光光度法 吸光光度分析法的基本概念和基本原理 吸光光度法概述 测量误差和显色条件的选择 紫外-可见分光光度计 定性和定量分析方法 第一节 吸光光度法概述 以肉眼可见的有色物质为例,其溶液之所以有颜色,是因为吸收了白色光中某段波长的光线,而其他没有被吸收的波长的光线则透过溶液,即肉眼所看见的颜色。物质颜色与吸 收光颜色的关系如表8-1所示。 第一节 吸光光度法概述 表8-1 物质颜色与吸收光颜色的关系 第一节 吸光光度法概述 不同的物质具有不同的分子结构,对不同波长的光会产生选择性吸收,因而具有不同的颜色。还有的物质对不可见光产生选择性吸收,凭人的肉眼就无法判断了,可以借助仪器的检测系统进行辨别。常见的吸光光度法的类型如表8-2所示。 第一节 吸光光度法概述 表8-2 波谱区名称 第二节 吸光光度法的基本概 念和基本原理 电磁辐射和电磁波谱类 一、 电磁辐射 1. 电磁辐射也称电磁波,是一种不需任何介质即可高速传播的粒子流,光属于电磁辐射的一部分,光具有波粒二象性,一般用波长(λ)、频率(ν)或波数(σ)来表示,波长越短,光的能量就越高。 λ=1/σ=c/ν(8-1) 式中,c为光速,c=3.0×108m·s-1。 E=hν=hcσ=hc/λ(8-2) 式中,h是普朗克常数,为6.63×10-34 J·s。 第二节 吸光光度法的基本概 念和基本原理 电磁波谱 2. 电磁辐射按波长的长短顺序排列和分段后称为电磁波
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