HPLC有关物质分析方法验证.ppt

化学药物有关物质 HPLC分析方法验证 第一页，编辑于星期三：一点 一分。 一、目的 了解与规范有关物质方法学验证。 第二页，编辑于星期三：一点 一分。 二、验证内容 1、专属性 2、检测限、定量限、 3、线性范围 4、响应因子 5、精密度(重复性、中间精密度和重现性) 6、准确度 7、耐用性 第三页，编辑于星期三：一点 一分。 指有其他成分（合成中间体杂质、降解物、副产物等）可能存在情况下采用的方法能准确测定出被测物的特性，能反映该方法在有共存物时对供试物准确而专属的测定能力，是指该法用于复杂样品分析时是否受到相互干扰程度的度量。 1、专属性 第四页，编辑于星期三：一点 一分。 1、专属性 试验方法 空白溶剂 系统适用性溶液5针 中间体及样品 中间体与样品混合溶液 破坏性试验（酸、碱、氧、高温、光照等，用到不同溶剂的，溶剂也要进样对照） 系统适用性溶液1针 图谱打印： 中间体与样品混合溶液、破坏性试验中主成分与主要杂质要打印出光谱纯度和分离度数据，如short+spectum格式打印。 系统适用必至少有一针用extend performance格式打印。 必要时提供3D图 第五页，编辑于星期三：一点 一分。 1、专属性 峰纯度结果 峰名称 纯度阈值 结果 峰名称 保留时间RT 相对保留时间RRT 评价：1、各峰之间的分离状况。2、各峰的峰纯度情况。 报告数据： 第六页，编辑于星期三：一点 一分。 (1)检测限(LOD) 检测限系指试样在确定的实验条件下，被测物能被检测出的最低浓度或含量。 是限度检验效能指标，无需定量测定，只要指出高于或低于该规定浓度即可。 2、灵敏度 第七页，编辑于星期三：一点 一分。 LOD试验方法 空白溶剂 系统适用性溶液5针 杂质对照品溶液进1针 根据上一针杂质对照品的S/N值进行稀释进样 直到S/N为约3时，平行进样3针。 系统适用性溶液1针 图谱打印： 杂质对照溶液及其稀释液均要以performance+noise格式打印。系统适用必至少有一针用extend performance格式打印 2、灵敏度 第八页，编辑于星期三：一点 一分。 (2)定量限(LOQ) 指样品中被测物能被定量测定的最低量，结果应具有一定准确度和精密度要求。  2、灵敏度 第九页，编辑于星期三：一点 一分。 LOQ试验方法 空白溶剂 系统适用性溶液5针 杂质对照品溶液进1针 根据上一针杂质对照品的S/N值进行稀释进样 直到S/N为约10时，平行进样3针。 系统适用性溶液1针 图谱打印： 杂质对照溶液及其稀释液均要以performance+noise格式打印。系统适用必至少有一针用extend performance格式打印 2、灵敏度 第十页，编辑于星期三：一点 一分。 2、灵敏度 报告数据： 检测限LOD浓度 杂质.A 杂质.B 杂质.C 杂质D 杂质.E 杂质.F 杂质.G 主成分 定量限LOQ浓度 杂质.A 杂质.B 杂质.C 杂质D 杂质.E 杂质.F 杂质.G 主成分 平均值 RSD 第十一页，编辑于星期三：一点 一分。 (1)线性: 在设计的范围内，测试结果与试样中被测物浓度直接呈正比关系的程度。 线形通常用最小二乘法处理数据求得回归曲线的斜率来表示。数据要求：至少需要五个浓度考察线形，需提供相关系数、y截距（是检定的可能偏差）、回归斜率及方差等参数，应列出回归方程数和线性图。 (2)范围： 指达到一定精密度、准确度和线性的条件下，测试方法适用的高、低限浓度或量的区间。 有关杂质测定应为被测杂质最低定量限至限度的150%。 3、线性与范围 第十二页，编辑于星期三：一点 一分。 3、线性与范围 线性与范围试验方法（包括主成分和杂质） 空白溶剂 系统适用性溶液5针 配制从定量限到杂质控制限度的150%的不同浓度样品不少于6个 （一般包括定量限、控制限度约50%、100%、150%等浓度）。 从低浓度依次到高浓度依次进样。 系统适用性溶液1针 图谱打印： 系统适用必至少有一针用extend performance格式打印 其他图谱可用short格式打印。 最后经calibration打出线性图谱及线性方程参数。 第