Aptamer技术在食品安全监测领域中的应用.ppt

Aptamer技术在食品监测领域中的应用 小组成员：何艳苏、吴佳、蔡旋 第一页，编辑于星期二：二十一点 十七分。 第一节 Aptamer技术的基本原理 一、Aptamer技术的发展历程 二、Aptamer技术的基本概念 二、Aptamer技术的原理 第二节 核酸适配体的产生 一、核酸适配体的制备 二、相较之于抗体的独特优点 三、其他优点 第二页，编辑于星期二：二十一点 十七分。 第三节 Aptamer技术在食品安全监测领域的应用 一、检测金属离子　 二、检测有机小分子 三、检测抗生素 四、检测真菌毒素 五、检测其他非法添加物 第四节 Aptamer技术的应用现状 一、探讨与展望 二、问题与挑战 第三页，编辑于星期二：二十一点 十七分。 第一节 Aptamer技术的基本原理 一、Aptamer技术的发展历程 1989年Nobel化学奖 University of Colorado 的Thoas Cach 和Yale 的Sydney Altaman发现了四膜虫第一类内因子和RNase P的RNA具有催化活性，证明RNA不仅是DNA到蛋白质的信号员，而且也可以像蛋白质一样催化化学反应。 引出 RNA是否是生命物质起源的问题？ 第四页，编辑于星期二：二十一点 十七分。 ????? 三件事证明RNA是生命物质起源的假说： 1、找到完全或主要依赖RNA进行生命活动的生物； 2、如果在现存生物的基因组里找到负责基本生命活动的功能性RNA的“痕迹”； 3、如果我们能从随机RNA序列库中筛选到能够完成基本生命活动的RNA序列。 前两个实现的困难较大，第三个如果对于任意给定对的粒子（包括离子、寡肽、蛋白质等），都能找出一个具有相当亲和性和特异性的RNA序列，我们就向证明“RNA起源说”迈出了一步。 第五页，编辑于星期二：二十一点 十七分。 90年代，人们用不同分子作为target筛选了和它们特异性结合的RNA分子，并开始命名其为aptamer。 Papers in《Science》and 《Nature》: 1 Tuerk C,Gold L.1990.Systemic evolution of ligands by exponential enrichment:RNA ligands to bacteriophage T4 DNA polymerase.Science 249:505-10; 2 Ellington AD,Szostak JW.1990.In vitro of RNA molecules that bind specific ligands.Nature 346:818-22 开始于生物化学，得宠于化学生物学 第六页，编辑于星期二：二十一点 十七分。 二、Aptamer技术的定义 1、核酸适配体是一段DNA或者RNA序列，是利用体外筛选技术从核酸分子文库中得到的寡核苷酸片段。 2、核酸适配体其本质是一段与靶物质具有高亲和力和高特异性的寡核苷酸链。 具有特异性强、稳定性好和靶分子广等特点，近年来被广泛用于食品安全检测领域。 第七页，编辑于星期二：二十一点 十七分。 三、Aptamer技术的原理 核酸分子之间可以通过碱基配对而特异性结合；但不限于此，核酸分子亦可形成多种稳定的次级结构，如茎环、发夹、假结、凸环、口袋等，与靶分子形成空间互补，通过静电作用、范德华力以及氢键等分子间作用力，而与靶分子紧密和特异性结合。 第八页，编辑于星期二：二十一点 十七分。 第二节 核酸适配体的产生 随着食品安全问题的频发，已经严重影响了消费者对于食品安全的信心。传统的食品安全检测方法包括气相色谱、液相色谱、质谱、原子吸收等，因为其灵敏度高，稳定性好被广泛地用于食品安全检测分析，但是开发简单、快速、高效食品安全检测方法仍是一项紧迫而重要的任务。 在这样的背景下，Aptamer技术应运而生。 第九页，编辑于星期二：二十一点 十七分。 一、核酸适配体的制备 核酸适配体是通过指数富集的配基系统进化技术(Systematic evolution of ligands by exponential enrichment. SELEX技术)筛选出来，SELEX技术是从体外一个含1015单链寡核普酸库中筛选出与靶物质结合的核酸，通过洗脱程序去除掉未与靶物质相结合的核酸，再以这些核酸为模板进行PCR扩增，随后进行下一轮筛选，通过重复的筛选与扩增，一些与靶物质不结合或与靶物质有低亲和力、中亲和力的DNA或RNA分子相继被洗去，而与靶物质有高亲和力