16 组织工程-优质课件.ppt

人工表皮、复合人工皮 A 表皮 B 表皮网状 棘 C 真皮乳头 D 真皮 E 皮下组织 F 毛发 组织工程皮肤技术路线 构建步骤 （1）种子细胞与培养液 成纤维细胞：DMEM培养基、10%胎牛血清、青 霉素、链霉素等。 表皮角质形成细胞：DMEM+Ham F-12培养基、 表皮生长因子等。 （2）支架材料 聚羟基乙酸（PGA）。 （3）构建成纤维细胞-PGA复合物 酶法消化收集真皮成纤维细胞，接种在PGA上， 加入培养液培养。 （4）接种表皮角质形成细胞在前面的复合物 上，更换表皮角质形成细胞培养基培养5天左右。 （5）双层皮肤成熟 将复合物放在可渗透膜上，进行气-液界面培养， 促进表皮角质形成细胞的进一步分化。 再培养1周，形成含真皮和表皮两层结构的组织 工程化皮肤。 难题 ： 1.血管化：血管生成是指内皮细胞构筑的毛细血 管分支和伸展。血管生成有助于损伤组织的修复。 2.毛囊、汗腺等再生。所以美容慎用。 3.排异性。 我国人造皮肤2007年第四军医大学开发成功，进 入临床阶段。 二 神经修复工程 神经远端轴突和髓鞘崩溃时，大量吞噬细胞 侵入，一方面清除轴突髓鞘的碎屑，另一方 面刺激原来处于休眠状态的雪旺细胞 (Schwann cell．SC)分裂和增生，并沿着每 一根神经纤维的神经内膜和基底膜排列成柱 状，形成一个潜在的管道（即Buengner氏细 胞带）；再生轴突通过Buengner氏细胞带， 伸延到终末器官，恢复其功能。最后产生髓 鞘，形成为有髓神经纤维。 （一）种子细胞 雪旺细胞(Schwann cell．SC)：SC形成能引 导再生轴突生长的Buengner氏细胞带，并能 分泌多种细胞因子调控再生轴突生长。 * 第16章 组织工程 本章主要内容 1.组织工程及其三要素 2.组织工程技术路线 3.组织工程反应器 4.组织工程产品 本节主要问题 种子细胞、组织工程材料、影响因子 16.1 组织工程及其三要素 1. 定义 组织工程(Tissue Engineering) ：是利用生命科 学、医学、工程学原理与技术，单独或组合地利 用细胞、生物材料、细胞因子实现组织修复或器官 再生的一门技术。 20世纪80年代提出概念。 Joseph P. Vacanti John Homans Professor of Surgery at Harvard Medical School Robert Langer Professor of Chemical and Biomedical Engineering at MIT 2. 组织工程三要素 1.种子细胞 2.支架材料 3.影响因子 （一）种子细胞 1.定义 种子细胞(Seed cell)：是组织修复或再生的细胞材料。 2.来源 （1）干细胞：胚胎干细胞、成体干细胞。 （2）功能细胞：组织来源的体细胞。 3.特点 容易获得和体外培养、遗传稳定。 4.问题 （1）同种、异种细胞存在免疫排斥等问题。 （2）干细胞潜在的理想种子细胞，诱导分化技术有待完善。 （3）多种类型细胞协调增殖、分化。 以骨为例 1-细胞 成骨细胞：合成ECMs、矿物质、 胶原，组装成新骨 破骨细胞：分泌酶使ECMs、矿物 质、胶原被吸收 软骨细胞：合成ECMs构成软骨 干细胞 2-支架 羟基磷灰石[Ca5(PO4)3OH，HA]、 胶原纤维 3-生长因子 骨形态发生蛋白 1、我们的市场行为主要的导向因素，第一个是市场需求的导向，第二个是技术进步的导向，第三大导向是竞争对手的行为导向。 2、市场销售中最重要的字就是“问”。 3、现今，每个人都在谈论着创意，坦白讲，我害怕我们会假创意之名犯下一切过失。 4、在购买时，你可以用任何语言；但在销售时，你必须使用购买者的语言。 5、市场营销观念：目标市场，顾客需求，协调市场营销，通过满足消费者需求来创造利润。**** 6、我就像一个厨师，喜欢品尝食物。如果不好吃，我就不要它。***** 7、我总是站在顾客的角度看待即将推出的产品或服务，因为我就是顾客。*** 8、利人为利已的根基，市场营销上老是为自己着想，而不顾及到他人，他人也不会顾及你。**** （二）支架材料 1.定义 组织工程支架材料是 指替代细胞外基质使 用的生物医学材料材 料。 纤维支架材料 细胞外基质 (extracellular matrixc, ECM ) （1）定义：动物细胞合成并分泌到胞外、分布在细 胞表面或细胞之间的大分子。 （2）分布：结缔组织中ECM含量较高。 （3）组成：构成细胞外基质的大分子包括：胶原、 非胶原糖蛋白、弹性蛋白、氨基聚糖与蛋白聚糖四大 类。 （4）功能： 1）ECMs提供细胞所需的力学和化学