分子生物学技术原理与应用教学大纲.docx

分子生物学技术原理与应用 一、课程说明 课程编号： 280309Z10 课程 名称： 分 子生 物学 技术 原理 与应 用/Principles and Application of Molecular Biology Techniques 课程类别：专业教育课程 学时/学分： 16/1 先修课程：细胞生物学、生物化学、分子生物学、分子生物学实验 适应专业： 生物科学 教材、教学参考书： 1. 药立波主编．医学分子生物学实验技术（第三版） ．北京：人民卫生出版 社． 2014； 2. 主编．分子生物学实验指导．长沙：中南大学出版社． 2015． 二、课程设置的目的意义 分子生物学技术的发展非常迅速， 分子生物学技术在生物科学和医学领域中 的应用越来越广泛， 分子生物学技术是生物科学和医学教学中的重要内容。 程的主要任务是使学生掌握基因转录调控分析的常用技术原理和必威体育精装版进展； 本课 外源 基因在宿主细胞中表达的基本技术原理、 术； 基因功能研究的总体策略和技术路线。 创新能力。 三、课程的基本要求 新进展和应用； 蛋白质空间结构分析技 通过课堂讲授培养学生的创新精神和 基本理论和基本知识： 1. 掌握电泳迁移率变动分析实验的原理；染色质免疫沉淀技术的原理；报告基 因技术原理； 核实时转录分析技术原理； cDNA 的 5 ˊ-端快速扩增技术原理； 基于 Gal4 的 DNA 结合蛋白分析技术原理；甲基化特异性 PCR 原理。熟悉 亚硫酸盐修饰后基因组测序； 染色质免疫共沉淀 -芯片技术； 染色质免疫共沉 淀-序列分析技术。 了解 DNA 甲基化检测的其他方法； 染色质构象捕获技术。 2. 掌握大肠埃希菌表达系统；蛋白质在原核细胞中的表达特点；外源基因表达 条件和优化。熟悉包含体的形成、变性与复性；蛋白质在原核细胞表达的调 控。了解芽胞杆菌表达系统；链霉菌表达系统；外源基因在原核细胞中表达 的鉴定；外源基因原核表达的基本操作；无细胞表达系统。 3. 掌握外源基因在哺乳动物细胞中的表达。熟悉真核表达外源基因的系统和方 式。了解外源基因在酵母细胞中的表达；外源基因在昆虫细胞中的表达。 4. 掌握 X 射线晶体衍射技术基本原理；核磁共振技术基本原理；低温电镜三维 重构技术基本原理。熟悉晶体结构解析步骤；核磁共振蛋白质溶液结构解析 ~ 1 ~ 22 2 2 步骤。了解低温电镜三维重构解析步骤。 5. 掌握基因功能研究的总体策略和技术路线。熟悉从分子水平研究基因产物的 功能特点；从细胞水平研究基因产物的作用机制；从整体水平研究基因产物 的生物学效应。 6. 掌握 RNA 干扰的原理； 获得 siRNA 的方法； siRNA 的沉默效应及脱靶效应。 熟悉 siRNA 载体转移至靶细胞和靶组织； siRNA 效应的分析。了解 RNA 干 扰概述； RNAi 的应用研究。 能力： 具有良好的自学习惯和能力、 有较好的表达交流能力。 具有综合运用 所掌握的分子生物学技术从事分子生物学及相关领域科学研究的能力。 具有较强 的创新性思维能力。 素质： 掌握分子生物学技术的基本理论、 基本知识，有求实创新的意识和精 神。 四、教学内容、重点难点及教学设计 章节 第 1 章 基因转 录调控 分析 第 2 章 外源基 因在原 核细胞 中的 表达 第 3 章 外源基 因在真 核细胞 中的 表达 教学内容 转录调节蛋 白与 DNA 的 结合分析；启 动子转录活 性分析； DNA 甲基化分析； 芯片技术在 基因表达调 控研究中的 应用 总 学 时 学时分配 讲课 实 (含研讨 ) 践 4 4 常用表达系 统及其选择； 外源基因的 表达和鉴定； 外源基因表 2 达条件和优 化；外源基因 原核表达的 基本操作 真核表达外 源基因的系 统和方式；外 源基因在酵 母细胞中的 表达；外源基 2 因在昆虫细 胞中的表达； 外源基因在 哺乳动物细 胞中的 教学重点 电泳迁移率变动分 析实验的原理；染 色质免疫沉淀技术 的原理；报告基因 技术原理；核实时 转 录 分 析 技 术 原 理； cDNA 的 5 ˊ - 端快速扩增技术原 理；基于 Gal4 的 DNA 结合蛋白分析 技术原理；甲基