小鼠糖耐量测定.pdfVIP

伊犁河谷小麦良种繁育基地建设项目 糖耐量测定 在第8 次免疫后即10.3 号，测定给药组和对照组小鼠的葡萄糖耐量情况。每 组取 6 只小鼠，每只小鼠的血糖值在本组平均血糖值附近。小鼠禁食不禁水 16h 后，每只小鼠腹腔注射剂量为 2g/Kg 的葡萄糖溶液。葡萄糖溶液的浓度为 400mg/mL ，体重20g 的小鼠注射剂量为0.1mL 。注射葡萄糖后0mi ，15mi ，30mi ， 60mi ，120mi 采用尾静脉取血的方式测定小鼠的血糖值。并在注射完葡萄糖后15mi 时取血，测定血清胰岛素水平。 血清胰岛素水平检测 血清胰岛素水平的测定采用 ELISA 方法。样本为糖耐量实验中腹腔注射葡 萄糖 15mi 时的各组小鼠血清。具体的实验步骤按照试剂盒说明书进行，大致的 操作流程如下：1、每孔加入50μ L 标准品，或者5 倍稀释的血清。2 、每孔加入 100μ L 酶标二抗，保鲜膜缠绕后37 ℃孵育60mi 。3 、Wash solutio 满孔洗板4 次。4 、 每孔加入50μ L 底物A 和50μ L 底物B，轻轻混匀，37 ℃避光孵育15mi 。5 、每 孔加入50μ L 终止液（2mol/L H SO ）（颜色由蓝变黄）6 、15mi 内在450nm 波长处 2 4 测定OD 值。7、通过标准曲线计算样品insuli 水平。 1 页脚内容