高中生物_动物细胞融合与单克隆抗体教学课件设计.ppt

探究一 动物细胞融合 1灭活的病毒诱导细胞融合的原理是什么? 2不灭活病毒的可以诱导细胞融合吗？ 探究一 动物细胞融合 （1）4??? y??? y小鼠的血清抗体效价最高（每空1分，共3分） （2）B淋巴细胞相互融合形成的细胞，骨髓瘤细胞相互融合形成的细胞（4分）细胞融合是随机的，其融合率达不到100%（4分） （3）1???? 100?? （每空1分，共2分） （4）不能无限增殖（2分） 专题二 细胞工程 动物细胞融合和单克隆抗体 1自主阅读，p52第二自然段，思考下列问题： 探究一 动物细胞融合 ①两个或者两个细胞 ②一个细胞 （杂交的单核细胞） （概念要点）： 什么是动物细胞融合？ 诱导方式 2.动物细胞融合技术的应用： ⑴突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能； ⑵为制造单克隆抗体开辟了新途径 探究一 动物细胞融合 获得杂种细胞或者细胞的产物 杂种植株 结果 克服远缘不亲和障碍 克服远缘不亲和障碍 意义 物理法化学法生物法 物理法化学法 诱导方式 分散单个细胞 酶解法去除细胞壁 融合前提 细胞膜的流动性 细胞膜的流动性 植物细胞全能性 原理 动物融合技术 植物体细胞杂交技术 项目 抗体不纯 抗原 动物体内 刺激 效应B 抗体（血清） 思考：传统抗体如何生产？有什么缺陷？ 缺点： 产量低、纯度低、抗体的特异性差 抗原不纯 探究二 单克隆抗体的制备 每一个B淋巴细胞只分泌一种化学性质单一，特异性强的抗体。 如果利用单个B淋巴细胞进行细胞培养，形成细胞群，这样的细胞群就有可能产生出化学性质单一、特异性强的抗体——单克隆抗体。 问题（阅读课本P53） 怎样获得化学性质单一、特异性强的抗体呢？ 探究二 单克隆抗体的制备 在体外培养的条件下，一个B淋巴细胞能无限增殖形成细胞群吗？ 什么样的细胞能够在体外无限增殖呢？ ——骨髓瘤细胞！ 探究二 单克隆抗体的制备 ⑵如何诱导融合？ 聚乙二醇 PEG ⑴如何得到B淋巴细胞？ ☆制备单克隆抗体的过程 ⑶细胞两两融合后，有哪些类型？ B-B 瘤-瘤 B-瘤(杂交瘤细胞) 未融合的细胞（A，B） ⑷整个过程筛选几次? 单克隆抗体制备过程中，总共有两次筛选，第一次筛选出杂交瘤细胞，第二次筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，两次筛选的原理和方法是不相同的。 ①首先用选择培养基筛选出杂交瘤细胞 ①细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。 ②人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但一般不分裂增殖。 ③鼠骨髓瘤细胞中只有D途径，没有S途径，可是能不断分裂增殖。 你想到筛选杂交瘤细胞的方案了么？ 小资料： 在培养液中加入氨基嘌呤，收集增殖细胞！ 加入氨基嘌呤后，使 D 合成途径阻断，仅有 D 合成途径的骨髓瘤细胞及其彼此融合的细胞就不能增殖，但人淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后的杂种细胞因为可以利用淋巴细胞中的 S 途径合成DNA而增殖。 通常进行克隆化培养和抗体检测的方法，将杂交瘤细胞多倍稀释，接种在多孔细胞培养板上培养，使每孔细胞不超过一个，再由这些单细胞克隆生长，然后检测各孔上清液中细胞分泌的抗体，那些上清液可与特定抗原结合的培养孔为阳性孔。最终选出分泌预定特异抗体的杂交细胞株进行扩大培养。 ②再筛选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞 阳性孔 在单克隆抗体制备过程中，两次筛选的原理和方法是不相同的。 ⑻如何得到大量的单克隆抗体？ 体内培养 体外培养 单克隆抗体特点： ——灵敏度高、特异性强、可大量制备 大胆尝试 科学家从某些能无限增殖的细胞的细胞 质中分离出无限增殖调控基因 (p r G) , 该基因能激发许多动物细胞的分裂 ,这 为单克隆抗体的制备提供了新的途径, 根据前面学习的知识 ，尝试用其