组培消毒剂 外植体的消毒.doc

外植体的消毒 植物组织培养用的外植体大部分取自室外或大棚里,表面上附着大量的微生物,这是组织培养的一大障碍。因此，在材料接种培养前必须要消毒处理，消毒一方面要求把材料表面上的各种微生物杀灭，同时又不能损伤或只轻微损伤组织材料而不影响其生长。因此，外植体的消毒处理是植物组织培养工作中的重要一环。 常用消毒剂的使用方法及效果 消毒剂 使用浓度/% 消毒时间/min 去除的难易 消毒效果 对植物毒害 酒精 70-75 0.1-1 易 好 有 升汞 0.1-1 2-10 较难 最好 剧毒 次氯酸钠 2 5-30 易 很好 无 过氧化氢 10-12 5-15 最易 好 无 漂白粉 饱和溶液 5-30 易 很好 低毒 新洁尔灭 0.5 30 易 很好 很小 硝酸银 1 5-30 较难 好 低毒 抗菌素/(mg.L-1) 0.4-5 30-60 中 较好 低毒 （1）酒精 酒精是最常用的表面消毒剂，酒精是最常用的表面消毒剂，以70%~75%酒精杀菌效果最好，95%或无水酒精会使菌体表面蛋白质快速脱水凝固，形成一层干燥膜，阻止了酒精的继续渗入，杀菌效果大大降低。 酒精具有较强的穿透力，使菌体蛋白质变性，杀菌效果好。同时它还具有较强的湿润作用，可排除材料上的空气，但酒精对植物材料的杀伤作用也很大，浸泡时间过长，植物材料的生长将会受到影响，甚至被酒精杀死，使用时应严格控制时间。但酒精不能彻底消毒，一般不单独使用，多与其他消毒剂配合使用。 （2）升汞 ? 又称氯化汞（HgCl2），常用的浓度为0.1%-1%。Hg2+可以与带负电荷的蛋白质结合，使蛋白质变性，从而杀死菌体。升汞的消毒效果极佳，但易在植物材料上残留，消毒后需用无菌水反复多次冲洗。升汞对环境危害大，对人畜的毒性极强，使用时需带上手套，使用后应做好回收工作。 （3）次氯酸钠 次氯酸钠是一种较好的消毒剂，它与水和二氧化碳反应能够生成碳酸氢钠、次氯酸，其中次氯酸有强氧化性，它可以释放出活性氯离子破坏蛋白质，从而杀死菌体。其消毒能力很强，不易残留，对环境无害。但次氯酸钠溶液碱性很强，对植物材料也有一定的破坏作用。 （4）漂白粉 也称 含氯石灰，一般情况下含有效氯30%左右，遇水后生成 次氯酸，有很强的杀菌作用。其有效成分是次氯酸钙[Ca(ClO)2]，消毒效果很好，对环境无害。但它因易吸潮散失有效氯而失效，故需要密封保藏。 （5）过氧化氢 ? 也称双氧水（H2O2），常用浓度为10%-12%。消毒效果好，易清除，又不会损伤外植体，常用于叶片的消毒。 （6）新洁尔灭 ? 也称 苯扎溴铵或 溴化苄烷铵，这是一种常用的表面活性消毒剂，新洁尔灭可以提高细菌胞浆膜的通透性，使内容物外渗，破坏细菌正常代谢。对绝大多数植物外植体伤害很小，杀菌效果好。