血液一般检验1.pptVIP

第一章 血液一般检验 安庆市第一人民医院 急诊检验科 查勇 本节重点 血清与血浆的本质区别 全血的种类以及用途 抗凝剂的种类及原理和应用 血液标本的采集方法及步骤 各种血细胞成分的瑞特染色情况 细胞成分 着色原理 着色情况 血红蛋白及嗜酸性颗粒 碱性物质，与酸性伊红结合 红色 淋巴细胞胞质及噬碱性颗粒 酸性物质，与碱性亚甲蓝结合 蓝色 中性颗粒 中性，与伊红、亚甲蓝可结合 淡紫红色 细胞核 强碱性核蛋白与伊红结合， 紫红色 酸性DNA与亚甲蓝结合 质量保证 染液质量 新鲜配置瑞特的染液偏碱，染色效果较差，需存放一定时间后再用 pH 由于蛋白质系两系电解质，所带电荷随溶液PH而定，在偏酸性环境中正电荷增多，易于伊红结合，染色偏红；在偏碱性环境中负电荷增多，易于亚甲蓝结合，染色偏蓝。因此要采用清洁、干燥、中性的玻片。 两种染色方法的对比 瑞特染色法：最常用，尤其是对于细胞质成分及中性颗粒等的染色，效果很好 吉姆萨染色法：对细胞核和寄生虫着色好，但对胞质颗粒着色较差 本节重点 一张合格的血涂片的要求 影响血涂片的因素 瑞特染色的原理、步骤以及影响因素 第二节 血涂片的制备与染色 一 血涂片制备 二 血涂片染色 外周血涂片检查是最有益的血液系统疾病检查手段，能为临床提供大量的信息。 因此，血涂片制备和染色的质量直接影响血细胞形态的检验结果。 一张合格的血涂片应该是厚薄适宜，血膜头、体、尾分明，分布均匀，两侧留有一定的空隙，边缘整齐。 血涂片制备方法 1．手工推片法 （1）薄血膜推片法（表1-4-2）：临床常用的方法，主要用于观察血细胞形态及仪器法检测结果异常的复查。 （2）厚血膜涂片法：取新鲜血液1滴于载玻片的中央，用推片的一角将血滴由内向外旋转涂布，制成厚薄均匀、直径约1.5cm的圆形血膜，待自然干燥后，滴加数滴蒸馏水，使红细胞溶解，脱去血红蛋白，倾去水，血涂片干燥后即可染色并用显微镜检查。 本方法特别适合检查疟原虫、微丝蚴等。 2．自动涂片法 目前有许多型号的自动血液分析仪，配备有血涂片仪和染色仪，可以按照检验人员的指令执行自动送片、取血、推片、标记和染色等任务。 【方法学评价】良好的血涂片是血细胞形态学检查的前提。血涂片制备的方法学评价见表1-7。 第二节 血涂片的制备与染色 推片 载玻片 血液 将推片匀速向前，勿停顿。涂片的厚薄取决于速度和角度：快、大(厚)。慢、小（薄） 一张满意的血涂片应厚薄均匀 头 体 尾鲜明 涂片干燥后用铅笔在血涂片的头 部写上姓名和编号 李四 B 1 2 3 第二节 血涂片的制备与染色 良好血液涂片标准 厚薄要适宜， 头体尾要明显， 细胞分布要均匀， 血膜边缘要整齐， 并留有一定的空隙。 引起血涂片分布不均的主要原因： 推片边缘不整齐 用力不均匀 载片不清洁 第二节 血涂片的制备与染色 二、血涂片染色 (一)瑞氏染色法 (Wrights stain ) 1.瑞氏染料（复合染料） 酸性染料伊红 (E-) 碱性染料亚甲蓝 (M+，又名美蓝) 美蓝容易氧化为一、二、三甲基硫堇等次级染料 (即天青) ， 甲醇的作用： ①溶解美蓝和伊红，解离为 M+和E- ； ②脱水作用，固定细胞形态，增强染色效果 第二节 血涂片的制备与染色 第二节 血涂片的制备与染色 2 ．染色原理 是染料透入被染物并存留其内部的一种过程。 ①物理的吸附作用 ②化学的亲和作用 嗜酸性颗粒——碱性——与酸性染料——粉红色； 噬碱性颗粒——酸性——与碱性染料——紫蓝色或蓝色； 中性颗粒——等电状态——与伊红和美蓝——染淡紫红色。 （3）染色方法与结果判断：染色方法见表1-11-1。 第二节 血涂片的制备与染色 勿冲洗再加瑞氏染色Ⅱ液5-8滴后将Ⅰ液和Ⅱ液充分混匀静置10分钟 直接流水冲洗3-5分钟 （切勿先倒掉染液） 涂片经水洗干燥后用油镜 分类计数100个白