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蝴蝶兰的组织培养
蝴蝶兰属兰科蝴蝶兰属植物,其花形状奇异清秀,花大艳丽,具有极高的观赏价值和经济价值。随着人们生活水平的不断提高,蝴蝶兰的市场需求量也越来越大,但蝴蝶兰为典型的单茎性热带附生兰,植物很少发生侧枝,分株繁殖系数极低。其种子没有胚乳,自然条件下很难萌发,通过自身的营养繁殖和种子繁殖均不能满足工厂化育苗的要求。应用植物组织培养技术开展蝴蝶兰的快速繁殖可以缩短育苗周期,在短时间内获得大量成株。我们对蝴蝶兰花梗芽组织培养技术开展研究,取得了很好的效果,为工厂化育苗提供了可能。外植体的选择和消毒 取蝴蝶兰花梗在自来水下用细软毛刷轻刷表面,并吸干表面水分,剪成2一3cm长的茎段。在工作台上按以下程序开展灭菌处理:将材料放入经高温灭菌过的烧杯中;参加70%的酒精浸泡20秒;0.1%的HgCl消毒8分钟,分2次开展,每次4分钟,灭菌后用无菌水冲洗5次,每次2分钟;用解剖刀切除坏死部分后,接入培养基。用此方法既能有效地消毒又不会对培养材料产生毒害,培养材料接入培养基后无褐化坏死现象出现。无菌材料的试管培养 培养材料的选择是蝴蝶兰组培决繁的关键。腋芽节位以下第3、4节花梗芽是最适宜的外植体,而谷胧甘肽200mg/L既能很好地抑制褐化,又能促进试管苗的生长和分化,是蝴蝶兰组织培养中最合适的褐化抑制剂。B5+GA32.0mg/L+NAAO.lmg/L是较适宜的愈伤组织诱导培养基,B5+6BA1.0mg/L+NAAO.2mg/L是较适宜的分化培养基,1/2MS+IBA1.2mg/L+NAA0.05mg/L及2%蔗糖是较适宜的生根培养基。 将消毒后的无菌培养材料接种在愈伤组织诱导培养基上,其培养基为B5+GA32.0mg/L+NAAO.lmg/L,培养基pH调至5.8,培养室温度控制在24士2℃。接种后遮光放置4一5天,而后每天光照12小时,2周后,切口处开始膨大,产生淡绿色瘤状愈伤组织,并不断增大。4周后将愈伤组织切下转接到分化培养基B5+6BA1.0mg/L+NAA0.2mg/L上,转瓶后愈伤组织的体积和重量成指数级增加,4周左右愈伤组织表面出现较大绿色颗粒,并形成芽点,继而分化出丛生芽。分化时出现褐化现象,可参加20omg几谷胧甘肤解除。当丛生苗长到3一4cm、具有4一5片叶时,将其移到生根培养基1/2Ms+IBA1.2mg/L十NAAO.05mg/L2%蔗糖上,10天后切口基部开始出现白色的根状突起,25天后,每株生根4条以上,生根率为95%以上。试管苗的炼苗移栽 试管苗移栽前需要有炼苗的过程,移栽前5天左右,在室内将封口膜打开1/3左右,使幼苗与空气有一定接触。2天后,移栽到驯化温室内,使幼苗完全暴露在空气中,要适当遮阳,防止高温和强光直接照射,3天后即可移栽。移栽时将幼苗取出,放在1000倍的多菌灵水溶液中小心洗去根部的培养基,去掉老叶,放入铺有湿报纸的盒子,要注意保湿。栽培基质为经过高温消毒后的苔鲜,用镊子划痕后,夹住幼苗根部,插入至第1轮叶,用手小心压紧,用薄膜覆盖,保持温度在21一25℃,相对湿度60%一80%,控制好水分和温度,移栽成活率可达90%以上。当新叶长出、新根伸长时,每周用0.3%一0.5%磷酸二氢钾开展叶面施肥1次,成苗率达80%以上。
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