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【Word版本下载可任意编辑】 PAGE 1 - / NUMPAGES 1 蝴蝶兰的组织培养技术 蝴蝶兰的组织培养技术蝴蝶兰为兰科多年生附--生草本，又名蝶兰，是兰科植物中栽培最为广泛的种类之一，主要分布在热带及亚热带地区。其花形奇特，色彩艳丽，花期持久，素有“兰中皇后”的美誉，具有极高的观赏和经济价值，在国内外花卉市场上极受欢迎。蝴蝶兰是单茎气生兰，植株上极少发育侧枝，比其他种类的兰花更难于开展常规无性养殖。组织培养是建立蝴蝶兰快速养殖无性系的重要手段。1 外植体的选择蝴蝶兰的茎尖、茎段、叶片、花梗侧芽、花梗节间、根尖等部位都已有培养成功的报道，方法各异，难度各有高低。蝴蝶兰不同外植体的成活率有差异，其中花梗侧芽的成活率最高，达75%；其次为花梗，成活率为 62.5%；叶片和根尖最差，分别为12.5%和 7.5%。针对不同外植体，取材方法也不同，通常取花梗节之间1~2cm长的幼嫩部分，切取长 2~3mm 的切段作为外植体。2 基本培养基的选择蝴蝶兰组织培养所采用的基本培养基包括 MS、1/2MS、VW、B5、KC、花宝及其改进型等，其中1/2MS对蝴蝶兰原球茎增殖效果最好。3 外源激素的选择目前常使用的外源激素主要是生长素类（如IAA、2,4-Ｄ和NAA）和细胞分裂素类（如BA、ZT、KT）。蝴蝶兰组织培养中常用的细胞分裂素为 6-BA，较高浓度（1~8mg/L）的 6-BA 能促进蝴蝶兰原球茎增殖，较低浓度（0.1~0.5mg/L）的 6-BA 则能促进原球茎分化。适宜浓度的 6-BA 配合较低浓度的 NAA，更有利于原球茎的增殖，2.0mg/L 6-BA 和 0.3mg/L NAA配合使用是蝴蝶兰原球茎增殖的最正确组合。4 培养基添加物对蝴蝶兰增殖和分化的影响蝴蝶兰组织培养中常参加一些天然物质如椰乳、香蕉泥、番茄汁、苹果汁等，这些物质能提供一些必要的微量营养成分、生理活性物质和生长激素等，如参加100~200mg/L香蕉泥，具有较大的 pH 缓冲作用，有利于兰科植物的壮苗和生根。许多资料也说明，添加适量的香蕉泥、椰乳或含胶质的果菜汁等均对原球茎增殖有明显促进效果。适量的添加物对蝴蝶兰丛生芽的诱导和生根也有一定的促进作用。培养基中添加活性炭，低浓度（0.5~1.0g/L）时对原球茎增殖影响不明显，但可促进蝴蝶兰生根；高浓度（2.0~3.0g/L）时对原球茎增殖有促进作用，但原球茎有黄化现象。蔗糖作为培养基的能源物质和渗透调节剂，对原球茎的增殖生长影响较大。蔗糖含量为 2%时，原球茎分化速度最快；蔗糖含量为2%~3%时，促进芽的形成；蔗糖含量为5%时，有利于根的分化和生长。蔗糖含量为3%~5%时，抑制原球茎的分化和生长，分化质量和分化速度都显著下降。5 原球茎继代中褐化的防治蝴蝶兰和其它兰科植物一样，原球茎状体在继代培养过程中易褐变死亡，不易增殖。在培养基中添加1~2g/L活性炭，适时切除培养物的褐化部分并及时更换新鲜培养基，能有效抑制外植体褐变死亡；培养基中参加10%椰子水，也能促进原球茎的生长，减少原球茎增殖过程中的褐变。蝴蝶兰的群体效应很明显，单芽容易褐化死亡，且增殖较慢，因此，刚诱导出的原球茎状体不能过早切割转移，在继代阶段接种时，应尽量防止切成单芽，增殖时切块也不宜过小，否则容易褐化死亡。6~8月份高温季节采芽排出的褐变物质多，成活率也最低，所以要防止在夏季采芽。6 外界条件对蝴蝶兰的影响培养基的pH值直接影响到培养物对离子的吸收，过酸或过碱都对植物材料生长有很大影响，此外，琼脂培养基的pH还影响到凝固情况。原球茎在pH值5.0~5.4的环境中生长最好，丛生芽的诱导与增殖在pH值5.6~5.8的环境中较好。蝴蝶兰在组织培养中，通常都以日光灯为光源，因此，可以人为地开展控制其光照强弱。光照强度对试管苗发根和生长势均有明显的影响。光照为3000lx对蝴蝶兰根诱导和植株生长有利。在诱导蝴蝶兰丛生芽过程中，由于所取的花梗芽为花芽，在培养过程中，较低的温度影响（15~22℃）会使大部分花梗芽发育成花芽；在较高温度（23~26℃）下培养，花梗花芽转化为营养芽，所以在开展蝴蝶兰丛生芽诱导时的适宜温度条件为（25±２）℃。7 生根壮苗及移栽生根壮苗阶段关键在于严格筛选激素的种类和浓度，一般需降低培养基的激素含量，以便形成健壮苗。常用的生长素有IBA(0.3~1.5mg/L)、NAA(0.1~0.8mg/L)。添加GA3 0.1mg/L + NAA 0.1mg/L 的组合能明显提高生根率，且植株健壮，长势好。蝴蝶兰属热带气生兰，具气生根，栽培上要求根部通气良好。现在蝴蝶兰移栽常用基质有水苔、椰糠、蛇木、树皮等，以水苔效果较好。综上所述，用组培方法快繁蝴蝶兰较传统养殖方法有3个明显的优点：①节省育苗用地；②