气相色谱法测定醒脑舒络片中右旋龙脑的含量.docVIP

气相色谱法测定醒脑舒络片中右旋龙脑的含量 醒脑舒络片是中药六类新药，由天然冰片、当归等药味组成，具有活血行气，醒脑通络作用。用于缺血中风恢复期之瘀阻脑络证，症见半身不遂、口舌喎斜、语言謇涩、肢体麻木、眩晕头痛、舌质紫暗、脉细涩，脑梗死具上述症状者。处方中的天然冰片是易挥发性药物，为控制产品质量，保证临床疗效，本文以右旋龙脑为含测指标，选择毛细管柱气相色谱法[1-10]，采用内标法对处方中天然冰片中的右旋龙脑进行含量测定研究，为制剂质量评价及稳定性研究提供依据。 1 实验材料 1.1 仪器 GC-1024气相色谱仪，FID检测器，GC-solution色谱工作站，AE240型电子分析天平，KQ2200B型超声波清洗器。 1.2 试药 右旋龙脑对照品（中国药品生物制品检定所，批号：111688-200501，供含量测定用）；水杨酸甲酯（中国药品生物制品检定所，批号：110707-200710，供含量测定用）；水为双蒸馏水；乙酸乙酯、乙醚、石油醚均为分析纯；醒脑舒络片（湖南省中医药研究院制备，规格：0.3g/片，批号200810172009030120090303） 　毛细管柱PEG-20M 30m×0.25mm×0.25μm （大连中汇达科学仪器有限公司）。 2、试验方法 2.1色谱条件 色谱柱：毛细管柱PEG-20M（30m×0.25mm×0.25μm） ；柱箱：160℃ ；检测器：氢火焰离子化检测器（FID）；温度：220℃ ；进样口：分流；温度：200℃；分流比：1:50 ；载气：氮气/空气 ；压力：114.3kPa；流量：总流量：54.0mL/min；柱流量：1.0mL/min；吹扫流量：3.0mL/min；线速度：30.4cm/sec；进样量：1μL 2.2供试品溶液制备方法：取重量差异合格的本品，除去包衣，研细，取1g,精密称定，置于25mL量瓶，加1mL内标液(25.118mg/mL)，用20mL乙酸乙酯浸泡2h，时时振摇，再用乙酸乙酯稀释至刻度，过滤（微孔滤膜0.45μm），即得。 2.3校正因子的测定：精密称定水杨酸甲酯2.5118g，置于100量瓶中，用乙酸乙酯溶解并稀释至刻度，摇匀，制成每1mL含25.118mg的溶液，作为内标溶液。精密称定右旋龙脑对照品0.0151g，置25mL量瓶中，精密加入内标溶液1mL,用乙酸乙酯溶解并稀释至刻度，摇匀，制成每1mL分别含0.604mg右旋龙脑和1.0047mg水杨酸甲酯的混合溶液[18]。吸取上述混合溶液1μL，注入气相色谱仪，重复进样3次。 2.4缺天然冰片的阴性样品的制备：取缺天然冰片的阴性样品,按供试品制备方法制备，再与醒脑舒络片供试品溶液、水杨酸甲酯内标物、右旋龙脑对照品溶液（无内标）、右旋龙脑对照品溶液（含内标）和空白溶剂（乙酸乙酯）按所定色谱条件测定。结果阴性无干扰，分离度好。见图1-5。 图1 水杨酸甲酯对照品GC色谱图 图2右旋龙脑对照品(无内标)GC色谱图 图3右旋龙脑对照品（含内标）GC色谱图 图4 空白溶剂GC色谱图 图5 缺天然冰片阴性样品GC色谱图 3.试验结果 3.1标准曲线制备 精密称取右旋龙脑对照品0.0502g，置于25mL量瓶，用乙酸乙酯溶解并稀释至刻度，摇匀，制成每1mL含2.008mg的溶液，作为储备液。精密称取水杨酸甲酯对照品0.0449g，置于10mL量瓶，用乙酸乙酯溶解并稀释至刻度，摇匀，制成每1mL含4.49mg的溶液，作为内标储备液。精密量取右旋龙脑对照品储备液（2.008mg/mL）1、2、3、4、5、6mL至10mL量瓶中，并分别精密加入内标储备液（4.49mg/mL）1mL，用乙酸乙酯溶解并稀释至刻度，摇匀。精密吸取浓度为0.2008、0.4016、0.6024、0.8032、1.0040、1.2048mg/mL的右旋龙脑对照品溶液1μL（均含内标0.449mg/mL），分别注入气相色谱仪中，按所定色谱条件测定其峰面积比值，以浓度为横坐标，右旋龙脑峰和内标物峰的峰面积比值为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程为：y＝2.9125x-0.024，r＝0.9999。结果表明右旋龙脑在0.2～1.2mg/mL范围内具有良好的线性关系。 3.2精密度实验 精密吸取供试品溶液1μL，重复进样6次，所得峰面积RSD为0.15%，表明本法精密度良好。 3.3 稳定性试验 精密吸取供试品溶液 1μL同一批号分别于0、1、2、4、8小时进样，其RSD为1.1%，表明供试品在8h内基本稳定。 3.4加样回收率实验 精密称取右旋龙脑对照品0.0828g，置于20mL量瓶，用乙酸乙酯溶解并稀释至刻度，制成每1mL含右旋龙脑4.14mg的储备液。 取