选修知识点及习题汇总.pdf

1、基因工程是在DNA分子 水平上进行设计和施工的， 又叫做DNA重组技术。变异 类型——基因重组 2、基因工程的基本工具限 制酶、DNA连接酶、运载体 （常见的是质粒条件？） 3、限制酶的功能：能够识 别特定的脱氧核苷酸序列， 并在特定位点将两个核苷 酸之间的磷酸二酯键断开， 因此具有专一性。切割时不 能破坏目的基因、标记基 因。 4、酶 DNA连接酶：连接两个双链 DNA片段形成磷酸二酯键； 限制酶：催化磷酸二酯键水 解，形成DNA片 ； DNA聚合酶：单个脱氧核苷 酸之间形成磷酸二酯键， 解旋酶：断开氢键 RNA聚合酶：单个核糖核苷 酸之间形成磷酸二酯键 DNA酶：催化磷酸二酯键水 解，形成脱氧核苷酸 5、基因工程的基本操作程 序是：①目的基因的获取 ②基因表达载体的构建 ③将目的基因导入受体细 胞 ④目的基因的检测与 鉴定 7、获取目的基因的方法有： 从基因文库中获取、利用 PCR技术扩增目的基因，人 工合成，逆转录法 9、基因工程的核心是基因 表达载体的构建（限制酶 +DNA连接酶处理质粒和目 的基因）。 基因表达载体的组成是：启 动子 目的基因 终止子 ＋ ＋ ＋标记基因复制原点+ 。 启动子:位于DNA上，其上 有RNA聚合酶识别和结合的 位点，驱动转录 起始密码：位于mRNA上， 开始翻译 标记基因的作用：鉴定受体 细胞中是否含有目的基因， 从而将含有目的基因的细 胞筛选出来。 常用的标记基因是抗生素 抗性基因（培养基中加入抗 生素进行筛选）。 目的基因与标记基因一般 ．．．．．．．．．．． 不是同一种基因。 ．．．．．．．． 11、（1）将目的基因导入 植物细胞：采用最多的方法 农杆菌转化 是 （双子叶） 法（Ti质粒上的T-DNA可转 移至受体细胞的染色体）， 其次还有 （单子叶）基因 枪法 花粉管通道法 和 等。 受体细胞若是体细胞，还要 利用植物组织培养技术。 2）将目的基因导入动物细 胞：最常用的方法是 显微 注射技术。受体细胞一般是 受精卵（具有全能性）， 若 为体细胞，则需采用细胞核 移植技术。 （3）将目的基因导入微生 物细胞：钙离子处理，使细 胞成为感受态细胞。 12、目的基因的检测与鉴 定：①首先要检测 转基因 生物的染色体DNA上是否插 入了目的基因，方法是采用 DNA分子杂交技术。 ②其次还要检测 目的基因 是否转录出了mRNA，方法是 分子杂交 术。（ 采用 技 ①② 都用基因探针：用放射性同 位素标记的目的基因的单 链， 都是碱基互补配 原理 对） ③最后检测 目的基因是否 翻译成蛋白质，方法是抗原 －抗体杂交。 ①②③都是观察有没有杂 交带。 有时还需进行 个体生物学 水平的鉴定，即接种实验 （即用病原体感染或让虫 子吃）。 基因工程的优点：定向改造 生物的遗传性状 14、蛋白质工程通过基因修 饰或基因合成，对现有蛋白 质进行改造，或制造一种新 的蛋白质，以满足人类的生 产和生活的需求。基因工程 在原则上只能生产自然界 已存在的蛋白质，而蛋白质 工程生产的蛋白质是自然 界不存在的。 程序： 15、植物组织培养技术原 理：植物细胞的全能性； 植物体细胞杂交技术原理 是：细胞膜的流动性和植物 细胞的全能 ，意义：克服 了远缘杂交的不亲和的障 碍。 ★植物细胞全能性实现的 条件：离体、一定的营养物 质、植物激素（生长素、细 胞分裂素）、适宜的外界条 件。 16、植物组织培养技术(无 菌操作) 过程：离体的植物器官、组 ．． 织或细胞