分子诊断技术的临床应用.ppt

分子诊断技术的临床应用; 狭义的分子诊断是基于核酸的诊断技术，是通过对DNA或RNA的检测来实现对疾病的检测和诊断。但是，随着第一张人类基因组测序图的完成，以及由此而带来的基因组学、蛋白组学、代谢物组学等新兴学科的发展，分子诊断的内涵已经从单纯的DNA/RNA拷贝、突变等变化的检测，拓展到核酸与DNA片段、蛋白与多肽、抗原与抗体、受体与配体等生物大分子的检测，并广泛应用于疾病的筛查、诊断、治疗监测、预后与预防等生命科学的各个领域。;根据分子诊断技术特征划分为三类：;???、基于测序技术为基础的分子诊断技术 DNA的序列分析是分子诊断学的金标准，各种遗传疾病，病毒或细菌的感染与变异，在基因表达水平上的个性化用药，多基因疾病的诊断与预测，最终都可以借助基因测序平台的应用。;三、基于扩增技术为基础的分子诊断技术 1983年Mullis发明了聚合酶链反应（Polymerase chain reaction，PCR），使体外扩增DNA成为可能，开启了体外扩增和操作DNA或RNA技术的发展。到现在，扩增DNA的技术已经成为分子诊断应用最广的技术之一，并发展变化了数十种核酸扩增检测技术。;二、PCR概述; PCR技术能在一个试管内将所要研究的目的基因或某一DNA片段于数小时内扩增至十万乃至百万倍，使肉眼能直接观察和判断；可从一根毛发、一滴血、甚至一个细胞中扩增出足量的DNA供分析研究和检测鉴定。;九十年代中期PCR临床应用在国内全面展开 1998年 荧光定量PCR技术开始在中国应用于临床检测 ;PCR技术;PCR概述——2000至2013年发表论文1280748篇;二、PCR概述; 高灵敏度 高特异性 简便快捷 高效扩增、忠实复制！ ;三、荧光定量PCR技术的临床应用;常规结核病实验室诊断方法及不足;荧光定量PCR检测TB-DNA的意义;3. 荧光定量PCR检出结核杆菌阳性率显著高于痰涂片抗酸染色和改良罗氏培养法。 4. TB-DNA浓度可用于判断疗效： 痰标本中结核杆菌的数量呈逐渐下降趋势 ，TB-DNA拷贝数下降。根据病原体DNA浓度，对药物治疗及疗效观察提供参考依据 ;;三 遗传病 1、等位基因检测 2、多基因遗传病的突变检测 3、基因表达异常所致遗传病检测 ;四 其它应用 1. 法医学鉴定 2. 抗病毒药物疗效的观察、指导 3. 缩短诊断的窗口期;窗口期：;　　 提供直接证据缩短“窗口期” ;;;四、PCR检测的标本采集要求;;五、NAT（核酸检测）技术类型：;实时荧光核酸恒温扩增检测技术（SAT）;（SAT）技术原理：;SAT 检测技术的优势：;总结; 分子诊断学的快速发展，得益与分子诊断技术的日新月异。1990年启动的人类基因组计划的完成经历了十三年的时间，而2007启动的1000人基因组计划的完成却只用了3年，人类了解自然密码的速度正在跨上快速列车。检验医学以提供精密准确的数据服务于临床，而分子诊断技术正逐渐成为临床实验室的常规应用技术，这将为检验医学的发展提供巨大的机遇与挑战。;;感谢 聆听！