化妆品中7种染发剂的检测方法.docx

化妆品中 7 种染发剂的检测方法 （征求意见稿） 适用范围 本方法规定了化妆品中酸性紫 43（CAS：224-618-7，CI 42510 ）；碱性紫 14（CAS： 632-99-5，CI42510）；酸性橙 3（CAS：228-921-5）；碱性黄 87（CAS：116844-55-4）； 碱性蓝 26（CAS：2580-56-5，CI44045）；碱性红 51（CAS：12270-25-6）；碱性橙 31（CAS：97404-02-9）7 种染发剂含量的高效液相色谱测定方法。 本方法适用于染发类和烫发类化妆品中碱性红 51、碱性紫 14、酸性紫 43、碱性蓝 26、碱性橙 31、酸性橙 3、碱性黄 87 等 7 种染发剂含量的测定。 方法提要 试样经甲醇超声提取后，过 0.45μm 滤膜，采用高效液相色谱系统分离，紫外检测器或二极管阵列检测器进行检测，外标法定量。若取 5.0g 样品，本方法对碱性红51、碱性紫 14 的检出限为 0.06mg/kg；酸性紫 43、碱性蓝 26 的检出限为 0.6mg/kg； 碱性橙 31、酸性橙 3 的检出限为 1.2mg/kg；碱性黄 87 的检出限为 3.0mg/kg；最低定量浓度分别为：碱性红 51、碱性紫 14：0.2mg/kg、酸性紫 43、碱性蓝 26 为 2.0mg/kg； 碱性橙 31、酸性橙 3 为 3.5mg/kg；碱性黄 87 为 10mg/kg。 试剂和材料 除另有规定外，所用试剂均为色谱纯，水为一级水。 甲醇。 四氢呋喃。 乙酸铵：分析纯。 3.4 乙酸铵溶液（0.02mol/L）：称取 1.54 g 乙酸铵（3.3），加水至 1000 mL，溶解，经 0.45μm 滤膜过滤。 染发剂标准物质：酸性紫 43（Acid Violet 43，CAS：224-618-7，CI 42510 ）；碱性紫 14（Basic Violet 14，CAS：632-99-5，CI42510）；酸性橙 3（Acid Orange 3，CAS： 228-921-5）；碱性黄 87（Basic yellow 87 ，CAS：116844-55-4）；碱性蓝 26（Basic Blue 26，CAS：2580-56-5，CI44045）；碱性红 51（Basic red 51，CAS：12270-25-6）；碱性橙 31（Basic orange 31，CAS：97404-02-9）；纯度均≥90%。 染发剂混合标准储备液（1.0 mg/mL）：分别称取 7 种染发剂标准物质（3.5）0.1 g （精确至 0.1mg）于 100 mL 容量瓶中，甲醇（3.1）稀释定容。 染发剂混合标准系列溶液：分别移取一定量的 2 种染发剂（酸性紫 43；碱性紫14）标准储备液（3.6），用甲醇配制成浓度为 5.0、10.0、20.0、30.0、40.0、50.0μg/mL的标准系列溶液；分别移取一定量的5 种染发剂（酸性橙3；碱性黄87；碱性蓝26； 碱性红 51；碱性橙31）标准储备液（3.6），用甲醇配制成浓度为1.0、2.0、4.0、6.0、 8.0、10.0μg/mL 的标准系列溶液。 仪器与设备 高效液相色谱仪：配紫外检测器或二极管阵列检测器。 分析天平：感量分别为 0.1 mg 和 1.0 mg。 超声波清洗器。 涡旋混匀器。 有机微孔滤膜：0.45μm。 分析步骤 样品预处理 准确称取试样 5.0g（精确至 1mg）于 25ml 比色管中，加入 1.0 ml 四氢呋喃（3.2），再加入 20ml 甲醇（3.1），涡旋振荡 2min，在超声提取 30min 后，放置至室温，用甲醇（3.1）定容，摇匀，过 0.45μm 滤膜，待测。 色谱参考条件 色谱柱：C18 柱，250mm×4.6mm（内径），5μm；或相当者。 流动相：A 相（甲醇）+B 相（0.02mol/L 乙酸铵（pH=4.0），梯度洗脱程序见表 1。 流速：1.0 mL/min 柱温：30 ℃ 进样量：10μL 检测器：紫外检测器或二极管阵列检测器 检测波长：碱性蓝 26 为 616 nm；碱性红 51、碱性紫 14、酸性紫 43 为 520 nm； 碱性橙 31、碱性黄 87、酸性橙 3 为 480 nm。 表 1 梯度洗脱程序 时间，min 0 10 流动相 A（%） 5 30 流动相 B（%） 95 70 25 80 20 35 80 20 测定 本方法采用外标校准曲线法定量测定。以系列标准溶液浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，作标准曲线线性回归方程，以试样的峰面积与标准曲线比较定量。 计算 试样中染发剂的含量（μg/g），按式（1）计算： w ? C ?V (1) m 式中：w—试样中染发剂的含量，μg/g；