化妆品中地氯雷他定等15种物质的检测方法.docx

8 8 化妆品中地氯雷他定等 15 种物质的检测方法 范围 本方法规定了采用高效液相色谱-串联质谱法测定化妆品中地氯雷他定 （CAS No：100643-71-8）、氯苯那敏（CAS No：132-22-9）、阿司咪唑（CAS No：68844-77-9）、曲吡那敏（CAS No：91-81-6）、溴苯那敏（CAS No： 86-22-6）、苯海拉明（CAS No：58-73-1）、异丙嗪（CAS No：60-87-7）、羟嗪（CAS No：68-88-2）、奋乃静（CAS No：58-39-9）、西替利嗪（CAS No：83881-51-0）、氟奋乃静（CAS No：69-23-8）、氯丙嗪（CAS No：50-53-3）、氯雷他定（CAS No ：79794-75-5）、特非那定（CAS No ：50679-08-8）、赛庚啶（CAS No：129-03-3）等 15 种抗组胺类物含量的方法。 本方法适用于膏霜、乳液、水剂和啫喱等类型化妆品中地氯雷他定、氯苯那敏、阿司咪唑、曲吡那敏、溴苯那敏、苯海拉明、异丙嗪、羟嗪、奋乃静、西替利嗪、氟奋乃静、氯丙嗪、氯雷他定、特非那定、赛庚啶含量的测定。 方法提要 以甲醇为溶剂提取化妆品中抗组胺类物质，用高效液相色谱仪分离， 质谱检测器检测，采用保留时间和特征离子对丰度比定性，以待测物质相对应离子峰面积定量，以标准曲线法计算含量。 本方法对 15 种抗组胺类物质的检出限均为 1 ng/mL ，定量下限均为 ng/mL ，如以取样 0.2 g 计，检出浓度均为 250 ng/g，定量下限浓度均 为 500 ng/g 。 试剂和材料 除另有规定外，试剂均为分析纯，水为一级实验用水。 甲醇，色谱纯。 甲酸，色谱纯。 甲酸铵，色谱纯。 甲酸铵-甲酸水溶液：称取甲酸铵（3.3）6.3 g，加 1 mL 甲酸（3.2）， 加水 1000 mL 溶解，用 0.22 μm 滤膜过滤。 标准品，参考附录A。 标准储备溶液（ρ=1 g/L）：分别准确称取 15 种抗组胺标准品各 10 mg（必要时需折算），精确到 0.0001 g，置于 10 mL 容量瓶中，用甲醇（3.1） 溶解并定容。 混合标准储备溶液（ρ=2.5 mg/L）：准确移取各标准储备液 25 μ L 至 10 mL 容量瓶中，用甲醇（3.1）溶解并定容。4 仪器和设备 高效液相色谱-三重四极杆质谱联用仪。 超声波清洗器。 0.22 μm 滤膜。 离心机，10000 r/min。 涡旋振荡器。 4.6 天平，感量 0.0001 g。 4.7 天平，感量 0.001 g。 注：由于部分吩噻嗪类抗组胺物质在个别高效液相色谱-三重四极杆质谱联用仪上有吸附现象，这可能与其中的金属管道种类和仪器清洗有关， 因此在实验时应确认仪器没有影响实验结果的吸附存在。 分析步骤 标准溶液：用甲醇（ 3.1）稀释混合标准储备溶液，精密配制得浓度为 2、5、10、20、50 ng /mL 的系列浓度标准溶液。标准溶液现用现配。 样品预处理 准确称取样品 0.2 g，精确至 0.001g，置于具塞比色管中，加入甲醇（3.1） 40 mL，涡旋振荡 30 s，使试样与提取溶剂充分混匀，超声提取20 min（工作频率 20～43KHz，200 W），用甲醇（3.1）定容至 50mL，摇匀，必要时以 10000 r/min 离心 5 min。取上清液经 0.22 μm 滤膜过滤，滤液作为试样溶液备用。必要时用适量甲醇（3.1）稀释滤液备用。 色谱-质谱参考条件 色谱条件 色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱 (3.0 μm, 3.0×150mm)。 流动相：溶液 A：甲酸铵-甲酸水溶液（3.4），溶液 B：甲醇（3.1）， 梯度程序见表 1： 时间0 min 4 min 6 min 14 时间 0 min 4 min 6 min 14 min 16 min 16.1 min 20 min 流动相组成 A+B =50+50 A+B =50+50 A+B =35+65 A+B =0+100 A+B =0+100 A+B =50+50 A+B =50+50 流速：0.4 mL/min； 柱温：35 ℃； 进样量：2 μ；L 样品盘温度：4 ℃； 质谱条件 离子源：电喷雾离子源（ESI 源）； 监测模式：正离子多离子反应监测模式； 监测离子对及相关电压参数设定见表 2； 雾化气流速：3 L/min； 干燥气流速：15 L/min； 脱溶剂管温度：250 ℃； 离子源加热温度：400 ℃； 碰撞气：Ar，230 kPa； 离子化电压：4500 V 表 2 质谱监测离子对及相关电压参数设定表 编号 物质名称 母离子（m/z） 子离子（m/z） CE（V） 1 地氯雷他定 311.1 2