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毕业论文(设计) 题 目： shRNA抑制IDH1基因对人胶质 母细胞瘤细胞增殖与侵袭的影响 类 别： 科研型毕业论文（设计） 院 系： 药学院 专业班级： 学 号： 学生姓名： 指导教师： 时 间： 2016年11月 至 2017年5月 武汉生物工程学院本科论文（设计） PAGE PAGE I 目 录 TOC \o 1-3 \h \u 18073 学位论文作者声明 II 10598 摘 要 III 8002 关键词 III 32026 Abstract III 5816 Key words III 7193 1 前言 1 4664 2 材料与方法 1 26186 2.1 实验材料与仪器 1 11064 2.1.1 实验材料 1 11183 2.2 细胞培养 2 17526 2.2.1 细胞的获得 2 21452 2.2.2 细胞复苏 2 24631 2.2.3 细胞换液 3 30043 2.2.4 细胞传代 3 2485 2.2.5 细胞冻存 3 2185 2.3 质粒制备 3 29393 2.3.1 制备感受态细胞 3 28764 2.3.2 转化效率测试 3 12419 2.3.3 质粒小提 4 15336 2.3.4 慢病毒感染 4 5023 2.4 Western blot 5 18039 2.4.1 提蛋白 5 18662 2.4.2 BCA法测蛋白 5 21988 2.4.3 凝胶成像 5 637 2.5 MTT 6 4261 2.6 划痕实验 6 15938 3实验结果 6 12641 3.1 构建IDH1-shRNA慢病毒质粒 6 6033 3.2 转染检测抑制效果 6 19465 3.3 抑制IDH1蛋白表达对胶质瘤细胞增殖的影响 7 18556 3.4 抑制IDH1对胶质瘤细胞侵袭的影响 7 22720 4结论 8 23945 4.1 小结 8 6948 4.2 讨论 8 30816 参考文献 9 28849 致 谢 11 8483 文献综述 12 PAGE PAGE II 学位论文作者声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品。 本人完全了解有关保障、使用学位论文的规定，同意学校保留并向有关学位论文管理机构送交论文的复印件和电子版。同意省级优秀学位论文评选机构将本学位论文通过影印、缩印、扫描等方式进行保存、摘编或汇编；同意本论文被编入有关数据库进行检索和查阅。 本学位论文内容不涉及国家机密。 论文题目： shRNA抑制IDH1基因对人胶质母细胞瘤细胞增殖与侵袭的影响 作者单位： 作者签名： 年 月 日 PAGE PAGE III shRNA抑制IDH1基因对人胶质母细胞瘤细胞增殖与侵袭的影响 摘 要 目的：探讨shRNA抑制IDH1基因对人胶质母细胞瘤细胞增殖与侵袭的影响。方法：设计合成的三条shRNA并构建慢病毒质粒，在细胞水平上抑制IDH1表达并检测效果。选择抑制效果最强的进行后续功能试验。用293T细胞进行慢病毒包装并感染胶质母细胞瘤 U87MG,采用划痕及MTT实验检测细胞增殖以及侵袭的影响。 结果：shRNA抑制IDH1基因对人胶质母细胞瘤细胞U87MG的增殖与侵袭起到了促进作用。 关键词 ShRNA；胶质母细胞瘤细胞；IDH1基因；细胞增殖与侵袭 The Effects on cells proliferation and invasion in human glioblastoma by inhibiting IDH1 gene using shRNA Abstract Objective: To investigate the effect of shRNA on the proliferation and invasion of human glioblastoma cells by IDH1 gene. Method: Three shRNAs were designed and constructed. The expression o